微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

化腺苷單活化蛋白激β1抗體Human TNFα(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）ELISA試劑盒,

化間變型瘤激抗體Human IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit小鼠白介素27（IL-27）ELISA試劑盒,

化擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit兔子（Cortisol）ELISA試劑盒,

化三腺檸檬酸裂解抗體Human MBD2 ELISA Kit促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

化ATR抗體Human DNASE2(Deoxyribonuclease-2-alpha) ELISA Kit小鼠催產(chǎn)素（OT）ELISA試劑盒,

核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體Human LCMT1(Leucine carboxyl methyltransferase 1) ELISA Kit小鼠抑瘤素M（OSM）ELISA試劑盒,

天門冬酰連接糖基化11抗體Human Anti-LAMP2(Anti-lysosomal Associated Membrane Protein 2 Antibody) ELISA Kit小鼠中性粒彈性蛋白（NE）ELISA試劑盒,

衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體Human antiN) IgG  ELISA Kit小鼠抗受體（ATR）ELISA試劑盒,

產(chǎn)堿假單胞菌蘿卜硫素 90%Anti-NEDD4L/NEDD4-2  泛素連接NEDD4-2抗體人泛素A52殘留核糖體蛋白融合產(chǎn)物1(UBA52)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

素  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342)  化泛素連接NEDD4-2抗體人對(duì)氧2(PON2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

對(duì)氨乙酮 ARAnti-NCoR2  核受體輔助抑制因子2抗體人Nesfatin 1蛋白 (NES1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

對(duì)氨乙酮 99%Anti-NEP/MME  金屬肽鏈內(nèi)切抗體人對(duì)氧3(PON3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

金絲桃素  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥96%Anti-NDRG1/Cap43  分化相關(guān)因NDRG1抗體人D-多巴色素變位(DDT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

金絲桃素  96%Anti-Phospho-NDRG1 (Ser330)  化分化相關(guān)因NDRG1抗體人可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物(SC5b9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

真空手套箱過濾器濾芯Anti-Phospho-NDRG1 (Thr346)  化分化相關(guān)因NDRG1抗體人泛素羧端酯L1(UCHL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

上門維修費(fèi)用Anti-NDRG2  抑癌因NDRG2抗體人泛素蛋白連接E3成分N-識(shí)別蛋白4 (UBR4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

真空手套箱用手套 丁合成橡膠Anti-NDRG3  抑癌因NDRG3抗體人黏病耐藥蛋白1(MX1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(溴)環(huán)烷 97%Anti-NDRG4  抑癌因NDRG4抗體人血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4-溴 98%Anti-Nesfatin-1/Nucb2  新的飽食分子蛋白抗體人泛素結(jié)合E2A(UBE2A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99%Anti-NCX1/SLC8A1  鈉鈣交換蛋白1抗體人胞外超氧化物歧化(SOD3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

3-乙 98%Anti-NCX2/SLC8A2  鈉鈣交換蛋白2抗體人癌抗雌激素藥物耐藥性因1(BCAR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

3-丁 98%Anti-Nebulin  伴肌動(dòng)蛋白抗體人II D組脂A2(PLA2G2D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

 激動(dòng)素 99%Anti-NCX3(Na+/Ca2+ exchanger3)  鈉鈣交換蛋白3抗體人II A組脂A2(PLA2G2A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒