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公司介紹主營產(chǎn)品

上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。

公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。

公司主推品牌：（進口、國產(chǎn)） Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。

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產(chǎn)品簡介在線詢價

貨號	GOY-01X0074

結(jié)直腸腺癌上皮細胞：DLD-1 公司正在出售的產(chǎn)品：酵母粉葡萄糖瓊脂（YDC） Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 250g1g Lactulose 室溫保存50T 麻疹病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸，-20℃保存5mL 平滑肌細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存250mL Anti

結(jié)直腸腺癌上皮細胞：DLD-1 產(chǎn)品詳情

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱	結(jié)直腸腺癌上皮細胞：DLD-1
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類	細胞系
貨號	GOY-01X0074

商品介紹：

名稱 結(jié)直腸腺癌上皮細胞：DLD-1

別稱DLD 1; DLD1; CoCL3

種屬人類

年齡（性別）成人

組織來源結(jié)直腸腺癌上皮細胞

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述DLD-1細胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細胞株中的一株。在ATCC和其它地方進行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細胞與HCT-15細胞相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。DLD-1細胞和HCT-15細胞的遺傳起源可通過DNA指紋鑒定證實，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細胞的CSAp陰性(CSAp-)，p53抗原表達呈陽性(p53抗原產(chǎn)生了一個C→T點突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性，癌基因N-myc的表達未做檢測。DLD-1細胞表達腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1細胞代數(shù)不明且污染了支原體，其后經(jīng)過12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理，處理之后每周用Hoechst染色和標準培養(yǎng)法檢測。其后連續(xù)11個月不加抗生素培養(yǎng)，DLD-1細胞所有的檢測呈陰性。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~24-48小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

抗原表達情況Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re

基因表達情況carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.

使用方法：

收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠 TF 基因全長ORF克隆

大鼠 NET1 基因全長ORF克隆

大鼠 ARFGAP3 基因全長ORF克隆

大鼠 AK1 基因全長ORF克隆

大鼠 THTPA 基因全長ORF克隆

大鼠 EHD2 基因全長ORF克隆

大鼠 ALDH9A1 基因全長ORF克隆

大鼠 MRPL45 基因全長ORF克隆

大鼠 ENO1 基因全長ORF克隆

大鼠 PNPLA3 基因全長ORF克隆

結(jié)直腸腺癌上皮細胞：DLD-1 300U T7 DNA 聚合(未修飾) T7 DNA Polymerase（unmodified） -20℃保存

DTNB 肌萎Dystrobrevin β蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Transaldolase 1 轉(zhuǎn)醛醇抗體規(guī)格: 0.2ml

UGT1A9 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移1A9 規(guī)格: 0.2ml

DPY19L2 DPY19L2蛋白抗體規(guī)格: 0.2mllaminin 層粘連蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化熱休克因子1抗體規(guī)格: 0.2mlPAR-1/Thrombin receptor 蛋白激活受體-1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-ATRIP (Ser224) 系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體規(guī)格: 0.1ml

200次 ADP/ATP發(fā)光法細胞活力檢測試劑盒 ADP/ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit -20℃或-80℃避光保存

PPHLN1 脈周蛋白1抗體（胃抗原蛋白Ga50）規(guī)格: 0.2ml

GlyR alpha 1/2/3 受體alpha 1/2/3型抗體規(guī)格: 0.1ml

CD147/TCSF/Emmprin 細胞外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子抗體規(guī)格: 0.1ml

1瓶 HPAC細胞株 HPAC 低溫運輸和保存

關(guān)鍵詞：標準培養(yǎng)箱顯微鏡 MRP

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