梭菌鑒別瓊脂(DCA)250g/瓶用于干燥食品中亞硫酸鹽還原梭 菌的計(jì)數(shù)
強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基,培養(yǎng)基批發(fā)250g/瓶用于梭菌的培養(yǎng)
人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞 強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)
強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂250g/瓶用于亞硫酸鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)和 培養(yǎng)
SC 瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(ISO),需添加 21009 及 21001
梭狀芽孢桿菌計(jì)數(shù)瓊脂250g/瓶用于厭氧亞硫酸鹽梭狀芽孢桿菌 計(jì)數(shù)(日本)
ATCC細(xì)胞株的品質(zhì),人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞國內(nèi)細(xì)胞的價(jià)格。對于初做細(xì)胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)問題,公司在細(xì)胞培養(yǎng)問題方面做了些總結(jié),希望對你們能有所幫助。
【人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細(xì)菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動(dòng)使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時(shí)pH 發(fā)生變化】細(xì)菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時(shí)間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細(xì)胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細(xì)胞,輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細(xì)胞。
【原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
【培養(yǎng)細(xì)胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大。細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。試劑保存不當(dāng)。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)。
1)增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。
2)讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補(bǔ)加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?br />6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細(xì)胞起始濃度太低,細(xì)胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細(xì)胞起始濃度。
10)換用新的保種細(xì)胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
厭氧卵黃瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于肉毒梭菌增菌分離,每 100ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)基批發(fā)中添加 3 支 21001
明膠磷酸鹽緩沖液250g/瓶用于肉毒梭菌和肉毒毒素檢樣的 制備
TSN 瓊脂250g/瓶用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的選擇性分離 和計(jì)數(shù)
TBB 培養(yǎng)基,培養(yǎng)基批發(fā)250g/瓶用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計(jì)數(shù)
強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)250g/瓶用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的計(jì) 數(shù)和培養(yǎng)