公司向您推薦小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的詳細(xì)說明：

產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度?？萍继峁┑募?xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細(xì)胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細(xì)胞因子的細(xì)胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細(xì)胞因子有依賴性的細(xì)胞株時還有加入適量細(xì)胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長特性，在適當(dāng)?shù)臅r候進(jìn)行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細(xì)胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細(xì)胞，一般按1：2-1：5 稀釋細(xì)胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實(shí)驗(yàn)操作步驟： 
a．采用認(rèn)可的方案處死人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

HE 瓊脂培養(yǎng)基Hektoen Enteric Agar Medium敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=4%改良BPLS瓊脂pSELECT-NGFP-blasti

三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基Triple Sugar-Iron-Agar Medium伏殺硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=7～3%，酮MIO培養(yǎng)基pSELECT-NHA-blasti

麥康凱瓊脂MacConkey Agar伏殺硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=7～3%，酮 XLT4瓊脂pSELECT-NHis-blasti

麥康凱肉湯MacConkey Broth克螨特 分析標(biāo)準(zhǔn)品，91%D/E中和肉湯pSELECT-NLucia-blasti

伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基Levine Eosin-Methylene Blue-Agar Medium克螨特標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%D/E中和瓊脂pSELECT-GFPzeo-LacZ

Baird-Parker 瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)Baird-Parker Agar Medium Base克螨特標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=4%M-肉湯pSELECT-GFPzeo-mcs

亞碲酸鉀卵黃增菌液標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=4%（）煌綠黃胺嘧啶瓊脂pSELECT-hygro-LacZ

Vogel-Johnson 瓊脂基礎(chǔ)Vogel-Johnson Agar Medium Base標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6%（劇LIM培養(yǎng)基pSELECT-hygro-mcs

1%亞碲酸鉀溶液1%sterile potassium lurite solution哌草磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，93%BETA-SSA瓊脂pSELECT-neo-LacZ

鹽胱氨酸培養(yǎng)基Fluid Selenite-Cystine Medium三氯殺蟲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液10μg/ml,u=2%,溶劑:異醇ITC肉湯pSELECT-neo-mcs

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞銪標(biāo)準(zhǔn)溶液  1000μg/ml CO2產(chǎn)氣袋 2.5L 嗜二氧化碳菌培養(yǎng)；適用于2.5L或7L密封培養(yǎng)罐大豆卵磷脂(磷脂酰膽堿)Mouse Txlna(Alpha-taxilin) ELISA Kit

Mouse DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA Kit

鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO₃2.5L密封培養(yǎng)罐  19.7×13.5×9.5cm；使用2.5L系列產(chǎn)氣袋1只，2.5升≤10皿酸氯倍他索Mouse Chia(Acidic mammalian chitinase) ELISA Kit

Mouse Chi3l4(Chitinase-3-like protein 4) ELISA Kit

鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL，基體：10%HCL7.0L密封培養(yǎng)罐  28.0×21.3×11.2cm 使用2.5L系列產(chǎn)氣袋3只，7.0升≤30皿溶劑黃157Mouse Anpep(Aminopeptidase N) ELISA Kit

Mouse Ndnf(Protein NDNF) ELISA Kit

銪標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000µg/mL in 10%HCL15×30cm培養(yǎng)袋  自帶密封壓槽，重復(fù)使用普侖司特Mouse Kap(Kidney androgen-regulated protein) ELISA Kit

Mouse IGFBP-7(Insulin-like growth factor-binding protein 7) ELISA Kit

醛標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml微需氧產(chǎn)氣袋  微需氧菌培養(yǎng)；適用于2.5L或7L密封培養(yǎng)罐

焦釩酸鈉Mouse Prnp(Major prion protein) ELISA Kit

Mouse Gypa(Glycophorin-A) ELISA Kit

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml厭氧產(chǎn)氣袋   *厭氧菌培養(yǎng)；適用于15×30cm培養(yǎng)袋

碲化鉍Mouse Klk1b22(Kallikrein 1-related peptidase b22) ELISA Kit

Mouse Nfkb2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L，溶劑：水微需氧產(chǎn)氣袋  微需氧菌培養(yǎng)；適用于15×30cm培養(yǎng)袋

蟾蜍衣提取物Mouse B4galt1(Beta-1,4-galactosyltransferase 1) ELISA Kit

Mouse Crry(Complement regulatory protein Crry) ELISA Kit

氟離子（F-）標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000mg/L，基體:水二氧化碳產(chǎn)氣袋   嗜二氧化碳菌培養(yǎng)；適用于15×30cm培養(yǎng)袋

二聚巰基酮Mouse Slco1a1(Solute carrier organic anion transporter family member 1A1) ELISA Kit

Mouse Acvr2a(Activin receptor type-2A) ELISA Kit

金標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml氧氣指示劑   厭氧培養(yǎng)監(jiān)測；1只/次，可重復(fù)使用4-5次

Mouse DNA topoisomerase 1) ELISA Kit

Mouse Crk(Adapter molecule crk) ELISA Kit

金標(biāo)準(zhǔn)溶液100.0μg/g，基體:0.5mol/l鹽酸3.5L厭氧產(chǎn)氣袋 *厭氧菌培養(yǎng)；適用于7.0L密封培養(yǎng)罐胡椒醇Mouse Eef2(Elongation factor 2) ELISA Kit

Mouse MAOB(Amine oxidaseB) ELISA Kit

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。