實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無(wú)效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit |
貨號(hào) | GOY-R74636 |
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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱(chēng)取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序：
1. 加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
2,2′-聯(lián)嘧啶 34671-83-5肉蓯蓉（管花肉蓯蓉）骨骼肌特異性受體酪氨酸激酶(MUSK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)96%
1-氨基茚滿(mǎn) 34698-41-4黃荊子糖化血紅蛋白(HbA1C)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1-氨基茚滿(mǎn) 34698-41-4防已抑肽酶(AP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
(R)-(-)-3-甲基-2-丁胺 34701-33-2小葉榕皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%,ee 97%
5-羥基-1-茚酮 3470-49-3土槿皮FK506結(jié)合蛋白5(FKBP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
5-羥基-1-茚酮 3470-49-3頭花蓼單酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移酶2(MOGAT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1-丁基-2-吡咯烷酮 3470-98-2仙人掌二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移酶同源物2(DGAT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)>98.0%(GC)
5-甲氧基吲哚-3-乙酸 3471-31-6玳瑁二酰甘油-O-?；D(zhuǎn)移酶同源物1(DGAT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
5-甲氧基吲哚-3-乙酸 3471-31-6厚樸白細(xì)胞衍生趨化因子1(LECT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
5-甲氧基吲哚-3-乙酸 3471-31-6地榆(地榆)足盂蛋白(PCX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1-[3-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol 347194-02-9胖大海夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
3-丁基噻吩 34722-01-5走馬胎ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
3-丁基噻吩 34722-01-5余甘子DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
2-三氟甲基喹啉 347-42-2赤脛散WNT1誘導(dǎo)信號(hào)通道蛋白2(WISP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
2-三氟甲基喹啉 347-42-2土大黃（皺葉酸模）沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Ensifer terangae
人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Termitomyces eurhizus
人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas avellanae
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Talaromyces trachyspermus
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Bacillus kochii
人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA Kit，48T/96T 用途: 食用菌
人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Flavobacterium glaciei
大鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒磷酸化癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體2,3-Dihydroisoginkgetin中文名：2,3-二氫異銀杏雙黃酮?jiǎng)e名：分子式：C32H24O10
磷酸化Bcl-2抗體2,3-Dihydrosciadopitysin中文名：2,3-二氫金松雙黃酮?jiǎng)e名：分子式：C33H26O10
磷酸化Bcl-xL蛋白抗體Corylifol A中文名：別名：分子式：C25H26O4
神經(jīng)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白ARID3B抗體Tsugafolin中文名：別名：分子式：C17H16O5
β晶體蛋白B1抗體Thevetiaflavone中文名：黃花夾竹桃黃酮?jiǎng)e名：分子式：C16H12O5
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9）在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
