選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱:豬肌酸激酶(CK)elisa試劑盒
英文名稱:Pig Creatine Kinase,CK ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液?
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過(guò)猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
YY肽(PYY)ELISA試劑盒 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 號(hào): 156682-54-1
多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Sediminibacterium salmoneum 號(hào): 156682-54-1
二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Talaromyces sp. 號(hào): 156682-54-1
類胰蛋白酶(TPS)ELISA試劑盒 用途: 食用菌 號(hào): 15679-12-6
胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒 用途: 與三葉草共生固氮 號(hào): 15679-13-7
強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Flammulina vutipes 號(hào): 15679-13-7
160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Hansenula anomala var. anomala 號(hào): 156-83-2
去唾液酸糖蛋白受體1(ASGPR1)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Aspergillus terreus 號(hào): 156-83-2
胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 號(hào): 156-87-6
特異性β1-糖蛋白(PSG1)ELISA試劑盒 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 號(hào): 156-87-6
溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Hypoxylon investiens 號(hào): 156897-06-2
膠質(zhì)細(xì)胞成熟因子γ(MPFγ)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Paracoccus pantotrophus ( 號(hào): 15692-07-6
98kDa核孔蛋白(NUP98)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Nocardiopsis fildesensis 號(hào): 1570-45-2
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒 用途: 用于餅粕發(fā)酵。 號(hào): 1570-45-2
鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)ELISA試劑盒 拉丁屬名: Syntrophobacter sulfatireducens 號(hào): 15707-23-0
煙色紅曲霉DPOLA/DNA polymerase alpha DNA聚合酶α抗體1 Kit
溝鯰愛(ài)德華氏菌NET1 神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體100 ul
變異庫(kù)克菌RAB8B ras癌基因家族RAB8B抗體100 ul
金灰青霉RALB Ras樣蛋白B抗體100 ul
紅色青霉RALA+RALB Ras樣蛋白A+B抗體100 ul
瘡皰丙酸桿菌RASGAP RAS的GTP酶激活蛋白抗體20 ul
解凝乳類芽胞桿菌RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體100 ul
動(dòng)物雙歧桿菌Rab11 ras癌基因家族Rab11蛋白抗體20 ul
膠凍樣類芽孢桿菌RAB2/RAB2A ras癌基因家族Rab2抗體100 ul
乳酒假絲酵母RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體100 ul
擴(kuò)展青霉RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c M)100 ul
雜色曲霉原變種RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體100 ul
拜耳接合酵母RAB20 ras癌基因家族RAB20抗體100 ul
血紅紅曲菌RAB3A ras癌基因家族Rab3a抗體20 ul
嗜堿芽孢桿菌Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體100 ul
土壤短芽孢桿菌RBP4 視黃醇結(jié)合蛋白4抗體1 Kit
檸檬明串珠菌REG1A 胰島細(xì)胞再生因子ICRF抗體300 ul
蒼白桿菌屬Renin 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體100 ul
內(nèi)毒素(endotoxin)分析檢測(cè)試劑盒 Mouse endotoxin Kit 規(guī)格: 96T/48T
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Brain derived neurotrophic facor Kit 規(guī)格: 96T/48T
腦鈉肽 Mouse Nt-proBNP KIT 規(guī)格: 96T/48T
腦鈉素(BNP)分析檢測(cè)試劑盒 Mouse BNP Kit 規(guī)格: 96T/48T
苗條素受體(Leptin receptor)分析檢測(cè)試劑盒 Mouse Leptin receptor KIT 規(guī)格: 96T/48T
免疫球蛋白M(IgM)分析檢測(cè)試劑盒 Mouse IgM Kit 規(guī)格: 96T/48T
豬肌酸激酶(CK)elisa試劑盒DNA methyltransferaseDNA甲基化轉(zhuǎn)移酶種屬: Cellulomonas│fimi糞堿纖維單胞菌
Phosphorylcholine磷酸膽堿種屬: Amanita│excelsa (Fr.) P. Kumm.塊鱗鵝膏菌
Cylindrospermopsin柱孢藻毒素種屬: Rhizobium│soli土壤根瘤菌
enterovirus-71腸道病毒71型種屬: Streptosporangium│kunmingense昆明鏈孢囊菌
Coxsackie virus A16柯薩奇病毒A16種屬: Enterococcus│durans subsp. fox耐久腸球菌狐貍亞種
Desmin結(jié)蛋白種屬: Shiraia│bambusicola Henn.#竹黃
Aflatoxin B1B1種屬: Pediococcus│hexosaceus已糖片球菌
Aflatoxin B2黃B2種屬: Coniothecium│sp.鑲孢霉
種屬: Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst.靈芝(紅芝)
Phosphorylated Myosin Light Chain磷酸化肌球蛋白輕鏈種屬: Phallus│hadriani Vent.粉托鬼筆
myosin light chain kinase肌球蛋白輕鏈激酶種屬: Pleurotus│djamor (Rumph. ex Fr.) Boedijn淡紅側(cè)耳
Parvovirus antibody細(xì)小病毒抗體種屬: Sporidiobolus│sp.鎖擲酵母
Feline calicivirus antibody貓杯狀抗體種屬: Sphingobacterium│siyangensis泗陽(yáng)鞘氨醇桿菌
種屬: Xanthomonas│pruni (Smith) Dowson黑李子葉細(xì)菌性穿孔病
P53P53蛋白種屬: Cytospora│mandshurica蘋果榦腐爛殼囊孢
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。