檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 豬透明質(zhì)酸(HA)elisa試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Porcine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit |
貨號(hào) | GOY-P73297 |
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實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
豬透明質(zhì)酸(HA)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
蘋(píng)果酸脫氫酶1(MDH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforMalateDehydrogenase1(MDH1)
粘蛋白4(MUC4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforMucin4(MUC4)
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforNeurotrophin4(NT4)
核心蛋白聚糖(DCN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforDecorin(DCN)
抗肌蛋白(UTRN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforUtrophin(UTRN)
纖維鞘相互作用蛋白1(FSIP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforFibrousSheathInteractingProtein1(FSIP1)
凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforThrombin/AntithrombinComplex(TAT)
L選擇素(SELL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforSelectin,Leukocyte(SELL)
多巴胺受體D2(DRD2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforDopamineReceptorD2(DRD2)
聚集蛋白聚糖(AGC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) KitforAggrecan(AGC)
醛脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
醛脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
醛脫氫酶1家族成員A2(ALDH1A2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
醛脫氫酶3家族成員A1(ALDH3A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
醛脫氫酶9家族成員A1(ALDH9A1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
醛糖還原酶相似蛋白1(ARL1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Protein kinase G蛋白激酶G種屬: Macrophoma│abutilonis Nakata et Takim.苘麻大莖點(diǎn)菌
Low Density Lipoprotein低密度脂蛋白種屬: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(武漢1號(hào))
low-density-lipoprotein cholesterol低密度脂蛋白膽固醇種屬: Pyricularia│oryzae稻梨孢菌
hypoxia-inducible factor 1α低氧誘導(dǎo)因子-1α種屬: Streptomyces│lavendulae var.chromogenes淡紫灰鏈霉菌產(chǎn)褐色變種
paraoxonase 1對(duì)氧磷酶1種屬: HycadegrabacterbohaiensisQ15THycadegrabacterbohaiensisQ15T
dopamine多巴胺種屬: Alishewanella│fetalis胎兒異希瓦氏菌
diamine oxidase二胺氧化酶種屬: Suillus│luteus (L.) Roussel褐環(huán)粘蓋牛肝
mast cell tryptase肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白酶種屬: Streptococcus│hemolytis-MGMG溶血性鏈球菌
Pulmonary surfatcant-associated proteinA肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A種屬: Cercospora│canescens Ellis & G. Martin變灰尾孢
Pulmonary surfatcant-associated protein B肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B種屬: Melanotus│flavolivens黃綠墨耳
Pulmonary surfatcant-associated protein C肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C種屬: Suillus│subaureus (Peck) Snell金乳牛肝菌
Pulmonary surfatcant-associated protein D肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D種屬: Fusarium│subglutinans (Wollenw. & Reinking) P. E. Nelson T膠孢鐮刀菌
secretory immunoglobulin A分泌型免疫球蛋白A種屬: Lactobacillus│sharpeae沙氏乳桿菌
Calpain鈣蛋白酶種屬: Zygosaccharomyces│pseudorouxii假魯氏接合酵母
Regulator of Calcineurin 1鈣調(diào)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白1種屬: Cladosporium│martianoffianum Thüm.馬丁枝孢