選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價(jià)。
產(chǎn)品名稱:大鼠CDCP1 elisa試劑盒
英文名稱:Rat CUB Domain Containing Protein 1,CDCP1 ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液?
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
3,5-二(三氟甲基)苯甲 32707-89-4杯莧甾酮(暫行)鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
氧化釕(IV) 水合物 32740-79-7莰烯蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)釕含量59.5%
氧化釕(IV) 水合物 32740-79-7姜酮骨形成蛋白1(BMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)釕含量59.5%
1-溴-2,4,5-三氟苯 327-52-6相思子堿脂蛋白a(Lpa)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1-溴-2,4,5-三氟苯 327-52-6異槲皮苷雌激素受體β(ERβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1-溴-2,4,5-三氟苯 327-52-6連翹酯苷A對氧磷酶1(PON1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
Tris(dimethylphenylphosphine)](2,5-norbornadiene)rhodium(I) hexafluorophosphate,97% 32761-50-5連翹酯苷B膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥97%
2,3-二氯甲苯 32768-54-0金石蠶苷低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白2(LRP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
2,3-二氯甲苯 32768-54-0川續(xù)斷皂苷乙生長停滯特異性蛋白6(GAS6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
2,3-二氯甲苯 32768-54-0灰氈毛忍冬皂苷乙突觸素(SYP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1,1,3,3-四甲基二硅氧烷 3277-26-7柳穿魚黃素脂聯(lián)素(ADP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
1,1,3,3-四甲基二硅氧烷 3277-26-7花旗松素高香草酸(HVA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
4-氨基-3-(三氟甲基)苯甲 327-74-2苦蒿素脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
4-氨基-3-(三氟甲基)苯甲 327-74-2人參皂苷Rd脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
2,4-雙(三氟甲基)溴苯 327-75-3羌活ⅩⅦ型膠原(COL17)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%
人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus caesiellus
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus sp.
人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: 無菌藥品 無菌檢查(陰性)
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Enterococcus hirae
人前膠原C端肽酶(PCP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link
人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
大鼠CDCP1 elisa試劑盒酸葉酯 97%干擾素調(diào)節(jié)因子3細(xì)胞活力臺盼藍(lán)染色試劑盒Fmoc-Thr(tBu)-OPfp 98%白芷(杭白芷)酸葉酯 97%,Kosher 磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3細(xì)胞肌酸激酶(CK)活性酶動力比色法定量檢測試劑盒芴甲氧羰基-O-叔丁基-D-蘇氨酸 98%桂皮柳酸葉酯 97%干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體細(xì)胞肌酸激酶(CK)總活性比色法定量檢測試劑盒FMOC-L-色氨酸五氟酯 98.0%地膽草柳酸葉酯 ≥97%, Kosher 磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體細(xì)胞肌酸激酶(CK)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒Fmoc-D-Trp-OPfp 98%格列吡嗪α-己基肉桂 92%磷酸化胰島素受體底物-1抗體細(xì)胞肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒N-Fmoc-O-芐基-L-磷酸酪氨酸 98%α-細(xì)辛腦α-己基肉桂 ≥95%,Kosher磷酸化胰島素受體底物-1抗體細(xì)胞肌酸激酶同工酶混合型(CK-MB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒Fmoc-Tyr(tBu)-OPfp 98.5%卡莫氟柳酸己酯 98%磷酸化胰島素受體底物-1抗體細(xì)胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量檢測試劑盒Fmoc-O-磷酸基-L-酪氨酸 98%桂美酸酸異戊酯 98%磷酸化胰島素受體底物-1抗體細(xì)胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒Fmoc-Tyr(PO<SUB>3</SUB>Bzl<SUB>2</SUB>)-OH 98.5%呋塞米
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。