【運(yùn)輸及保存】
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
【自備試劑】
一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
【使用方法】
一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA ,也可以另購本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對(duì)照
為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA 段作為陽性對(duì)照。使用本陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分 在專門的區(qū)域操作。 ?
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50次 |
貨號(hào) | BJP6359 |
訂購流程:
通過在線客服咨詢產(chǎn)品→確定產(chǎn)品→提供單位收貨信息→確立合同→安排發(fā)貨。
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對(duì)照:有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對(duì)照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長(zhǎng)期。
2.標(biāo)本結(jié)果判定:
(1)陽性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期。
(2)可疑:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長(zhǎng)期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無Ct值。
4-氨基-3-氯-5-甲基苯甲PRMT4 組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體規(guī)格:100 ul
4-氨基-3-氯-5-甲基苯甲TP53I13 腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制基因)規(guī)格:300 ul
3-四甲醇p53 DINP1 p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體規(guī)格:100 ul
3-四甲醇p73 alpha p53相關(guān)蛋白P73α抗體規(guī)格:100 ul
2,4-二氟苯甲酸Frizzled 1/Wnt receptor Wnt信號(hào)受體蛋白抗體規(guī)格:100 ul
2,4-二氟苯甲酸GNAT3 G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體規(guī)格:100 ul
2,4-二氟苯甲酸GPR124 G蛋白偶聯(lián)受體124抗體(腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物)規(guī)格:100 ul
2,2-二氟-1,3-苯并二惡茂GPR172B G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體規(guī)格:100 ul
2,2-二氟-1,3-苯并二惡茂GNAQ/Gα q G蛋白α亞單位蛋白Q抗體規(guī)格:1 Kit
3-氟鄰苯二甲酸RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體規(guī)格:100 ul
3-氟鄰苯二甲酸RASGEF1A 鳥嘌呤核苷酸交換因子rasgef1a抗體規(guī)格:100 ul
1-Boc-4-溴甲基哌啶RAB4 癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab4A抗體規(guī)格:100 ul
1-Boc-4-溴甲基哌啶NSP1/SH2D3A SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體規(guī)格:100 ul
3-溴苯甲醇STARD8 GTP酶激活因子STARD8抗體規(guī)格:20 ul
3-溴苯甲醇WASF3 Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體規(guī)格:100 ul
3-溴苯甲醇ARL3 ADP核糖基化樣因子ARL3抗體規(guī)格:20 ul
4-吡啶DIRAS1 RAS相關(guān)抑細(xì)胞生長(zhǎng)蛋白1抗體規(guī)格:100 ul
4-吡啶GRAP2 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體規(guī)格:100 ul
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)oriazain基因染料法PCR試劑盒CYP1A2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒Human Protein C ELISA KitC32H38O19
CYP1A2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒Human Serum amyloid P,SAP ELISA KitC22H28O6
CYP1A2蛋白免疫共沉淀分析試劑盒Human activated protein C,APC ELISA KitC23H28O6
CYP2B1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒Human Plasminogen,Plg ELISA KitC26H34O7
CYP2B1蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒Human Complement fragment 3b,C3b ELISA KitC22H26O11
CYP2B1蛋白免疫共沉淀分析試劑盒Human Free Protein S,F(xiàn)P-S ELISA KitC16H16O6
CYTOCHROME C(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)Human Ataxia angiectasia mutated,ATM ELISA KitC27H31O15Cl
CYTOCHROME C蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA KitC22H33NO4