檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74237 |
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實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
胰島素(INS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 新疆纖細(xì)芽孢桿菌 5g
胰島素樣生長因子1(IGF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% Amycolatopsis 25g
胰島素樣生長因子2(IGF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 松杉靈芝 5g
腎素(REN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 枯草芽孢桿菌 25g
組織因子(TF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 相思根瘤菌 5g
內(nèi)皮素1(EDN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 類芽孢桿菌屬 25g
半胱氨酸蛋白酶抑制劑3(CST3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99.5% metals basis,2.0μm 枯草芽孢桿菌 250g
骨橋素(OPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99.5% metals basis,2.0μm 高地芽胞桿菌 50g
前列腺素E1(PGE1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 耐冷冷桿菌 1g
前列腺素E合酶2(PTGES2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 鏈霉菌 5g
前列腺素E合酶2(PTGES2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 黃皮疣柄牛肝菌 25g
銅藍(lán)蛋白(CP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 籬邊粘褶菌 5g
醛固酮(ALD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ≥97% (HPLC) 綠色木霉=木素木霉 1mg
血小板因子4(PF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 暗孢節(jié)菱孢菌 1g
熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) >98.0%(GC) 韓國梅奇酵母 5g
血小板因子4(PF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 金龜子綠僵菌 1g
血小板因子4(PF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 短芽胞桿菌 5g
維生素K1(VK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 綠色木霉 1g
冰凍切片組織αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 GPX5 100 ul
石蠟切片組織αSMA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 GPX8 100 ul
細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)比色法定量 GRAMD1B 100 ul
細(xì)胞αSMA蛋白表達(dá)熒光定量 GRAMD4 100 ul
αSMA蛋白表達(dá)西方雜交分析 GRB7 100 ul
αSMA蛋白免疫共沉淀分析 GRHPR(Glyoxylate Reductase/Hydroxypyruvate Reductase) 100 ul
αSMA蛋白表達(dá)定量 GRID1 100 ul
?細(xì)胞COLLAGEN III蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀 GPS2 100 ul
載玻片細(xì)胞COLLAGEN III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 GPSM2 100 ul
冰凍切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 GPRIN3 100 ul
石蠟切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 GPR17 100 ul
?載玻片細(xì)胞βCOLLAGEN III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 GPR177 100 ul
?冰凍切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 GPX4 100 ul
?石蠟切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 GPR183(G-protein coupled receptor 183) 100 ul
?細(xì)胞COLLAGEN III蛋白表達(dá)比色法定量 GPR162 100 ul
?細(xì)胞COLLAGEN III蛋白表達(dá)熒光定量 GPR177 100 ul