客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:Cy3, 乙二胺
規(guī)格:1 mg/5 mg
貨號:BJP1118
分類:熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
蘆竹堿87-52-5實驗方法M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb20 ul
密蒙花苷20316-62-5實驗步驟M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAb100 ul
綿馬酸ABA38226-84-5*THEX1 Antibody1000 ml
檸檬苦素1180-71-8實驗步驟Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) 300 ul
松屬素480-39-7實驗方法Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb100 ul
人參皂苷Rg2 52286-74-5 價格Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAb100 ul
肉豆蔻木脂素171485-39-5價格THEX1 (D2B4) Rabbit mAb100 ul
石蒜堿476-28-8 價格PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAb20 ul
四氫小檗堿522-97-4價格PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAb100 ul
天麻素62499-27-8實驗方法Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody100 ul
吳茱萸堿518-17-2*THEX1 (D66A11) Rabbit mAb300 ul
香葉木素520-34-3實驗方法Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb100 ul
煙堿54-11-5實驗步驟Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb300 ul
洋川芎內(nèi)酯I94596-28-8?實驗方法Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb100 ul
異綠原酸A2450-53-5價格Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb20 ul
異綠原酸C32451-88-0實驗步驟Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb100 ul
原花青素 4852-22-6實驗方法Akt3 Antibody100 ul
Cy3, 乙二胺Pleurotus│nebrodensis分離基物: 朽木斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 17生長條件: 20℃存儲條件: 定期移植法
Erysipelothrix│rhuriopathiae分離基物: 丹毒豬凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清定性培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物: 枝干斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生產(chǎn)代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Bacillus│thuringiensis Berliner斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 害蟲生物防治培養(yǎng)基: 141生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
Aspergillus│niger凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 以淀粉為原料生產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Yersinia│pestis凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0132生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Thalassospira│lucentensis分離基物: 水樣/表層海水凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質(zhì)篩選;4.海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Stachybotrys│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Glauconic acid or Glaucanic acid培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)
Escherichia│coli分離基物: 斑羚腸道凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué),形態(tài)研究,教學(xué)使用。培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費(fèi)用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。