參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：蘄蛇PCR鑒定試劑盒
產(chǎn)品貨號：YS-P013705
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．公司產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
猴促生長激素釋放激素(GHRH) 二氫辣椒堿（標(biāo)準(zhǔn)品）神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體
猴冷球蛋白(CG) 五味子酯（標(biāo)準(zhǔn)品）MYRIP蛋白抗體
猴生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)柴胡皂苷B1（標(biāo)準(zhǔn)品）髓磷酯髓鞘蛋白1抗體
猴Apelin 13(AP13) 苷松新酮（標(biāo)準(zhǔn)品）巨噬克隆激因子抗體
猴核孔蛋白62KDa(NUP62)白花前胡素（標(biāo)準(zhǔn)品）膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體
猴纖維蛋白原γ(FGγ)白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II（標(biāo)準(zhǔn)品）肌球蛋白輕鏈激酶抗體
猴β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2) 蟾靈;蟾酥靈（標(biāo)準(zhǔn)品)單紡錘體蛋白激酶1抗體
猴血管緊張素原(AGT) 斷血流皂苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體
猴碳酸酐酶II(CA2)三白草酮（標(biāo)準(zhǔn)品）單氧化酶B抗體
猴干因子(SCF)大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）微小染色體維持缺陷蛋白4抗體
猴酰肽受體2(FPR2)異蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體
猴肝配蛋白A受體3 (EPHA3)蓮心堿高氯酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）髓鞘因調(diào)控因子抗體
猴γ1肌動蛋白(ACTG1)酞（標(biāo)準(zhǔn)品）肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體
猴I型前膠原羧端原肽(PICP)茯苓酸（標(biāo)準(zhǔn)品）磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗體
猴血管活性腸肽(VIP)(-)-丁香樹脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）促代謝型谷氨酸受體2抗體
猴C4結(jié)合蛋白α(C4BPα) 柯里拉京（標(biāo)準(zhǔn)品）代謝型谷氨酸受體-3抗體
蘄蛇PCR鑒定試劑盒CRP/FITC 熒光素標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體IgG3-酸叔丁酯 97%
CRP/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體IgG三特丁膦 1.0 M in toluene
CRTAM/FITC 熒光素標(biāo)記CRTAM抗體IgG噻吩-2,3-二 98%
C-SKI/FITC 熒光素標(biāo)記抗C-SKI抗體IgGalpha-三聯(lián)噻吩 99%
CSIG/FITC 熒光素標(biāo)記衰老抑制因抗體IgG三(二亞芐酮)二鈀，氯加合物 98%
CSP/FITC 熒光素標(biāo)記環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體IgG三(2-)膦 97%
CT/FITC 熒光素標(biāo)記降鈣素抗體IgG四（三膦）鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%
CT-1/CTF1/FITC 熒光素標(biāo)記心肌營養(yǎng)素1抗體IgG2,2',7,7'-四溴-9,9'-螺二芴 98%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
