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  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2021-11-20
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限9
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9340
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黨參PCR鑒定試劑盒

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    上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生”品牌。


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規(guī)格50次 貨號(hào)YS-P013704 品牌YSRIBIO
黨參PCR鑒定試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
黨參PCR鑒定試劑盒 產(chǎn)品詳情

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服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

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黨參PCR鑒定試劑盒

50次

YS-P013704

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對(duì)原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡(jiǎn)便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

猴磷酸烯式酮酸羧激酶1(PCK1)紫草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體

猴抗膠原蛋白抗體(CLA) 紫草素,左旋紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品)微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體

猴泛素蛋白D(UBD)紫草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體

猴色氨酰tRNA合成酶(WARS)紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體

IgA Fc片段受體(FcaR)紫花前胡苷(標(biāo)準(zhǔn)品)雙微體2癌因結(jié)合蛋白抗體

猴成纖維生長(zhǎng)因子21(FGF21)紫蓳靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)金屬蛋白酶20

猴白調(diào)節(jié)素(LR) 紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)多藥耐藥相關(guān)蛋白8抗體

猴血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR3/Flt4)棕櫚酸(標(biāo)準(zhǔn)品)多藥耐藥相關(guān)蛋白7抗體

猴晚期糖化終末產(chǎn)物受體(AGER)  王不留行黃酮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)磷酸化卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體

猴絲氨酸蛋白酶(PRSS) 絡(luò)塞琳(標(biāo)準(zhǔn)品)酪氨酸蛋白激酶分裂素抗體

猴黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)絡(luò)緦(標(biāo)準(zhǔn)品)卡波西氏肉瘤皰疹病潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體

猴鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白4(GBP4) AT7519.HCl黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗體

猴腎上腺素(EPI) 培利替尼;貝利替尼;EKB569糖蛋白GNTVA抗體

猴纖維蛋白原相關(guān)蛋白1(FGL1)雷公藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)IGFBP2結(jié)合蛋白/遷移和侵潤(rùn)抑制蛋白抗體

猴骨成型蛋白受體1A(BMPR1A) 番瀉苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)微管相關(guān)蛋白1B抗體

猴角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰酶(TGM1)番瀉苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體
黨參PCR鑒定試劑盒CRHR1/CRFR1/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體IgG順-5-降烯-endo-2,3-二羧酸 98%

CRHR2/CRFR2/FITC  熒光素標(biāo)記促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體IgG5-降烯-2-羧酸 99%

Cripto-1/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽抗體IgG2--5-降烯 98%

Cripto-1/FITC  熒光素標(biāo)記畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端IgG5-硝苊 85.0%

CRLR/CALCRL/FITC  熒光素標(biāo)記降鈣素受體樣蛋白抗體IgG3-辛噻吩 98%

CRMP2/Dpysl2(collapsin response mediator protein-2)/FITC  熒光素標(biāo)記抗二氫嘧啶酶樣2抗體IgG9-咔唑 98%

Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgG9, 9′-螺雙芴 98%

CRP/Biotin  生物素化C-反應(yīng)蛋白抗體IgG二亞芐叉酮 98%

 


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大腸桿菌蛋白表達(dá) ¥99999 保定市 藍(lán)景科信河北生物科技有限公司 2024-08-07 在線詢價(jià)
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