商品介紹:
測(cè)定意義: MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的fu酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。 測(cè)定原理: MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱:線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
貨號(hào):BJ-01611148-1
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
黑皮質(zhì)su-1受體抗原紅細(xì)菌兔冷球蛋白(CG)elisa定量檢測(cè)試劑盒
髓樣白血病-1抗原芥鏈格孢猴TATA結(jié)合蛋白(TBP)elisa定量檢測(cè)試劑盒
多藥耐藥蛋白抗原Bacillus anthracis猴活化Ⅻ(FⅫa)elisa定量檢測(cè)試劑盒
肌增強(qiáng)因子2抗原小弧菌猴白共同抗原(LCA/CD45)elisa定量檢測(cè)試劑盒
線粒體融合蛋白1皺紋單胞菌猴磷脂酶D2(PLD2)elisa定量檢測(cè)試劑盒
金屬硫蛋白抗原側(cè)耳猴Smad同源物1 (Smad1/MADH1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
層粘連蛋白受體1抗體疣孢漆斑菌猴核糖核酸酶(RNASE)elisa定量檢測(cè)試劑盒
層粘連蛋白受體1抗原(C端)玉米大斑病菌猴Apelin 13(AP13)elisa定量檢測(cè)試劑盒
中期因子/肝su結(jié)合生長(zhǎng)因子抗原三色革裥菌猴松弛su/胰島su樣肽受體1(RXFP1)elisa定量檢測(cè)試劑盒
肌球蛋白輕鏈3抗原冷桿菌屬猴血栓烷受體(TP/TXA2R)elisa定量檢測(cè)試劑盒
巨噬移動(dòng)抑制因子抗原蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種猴白三烯E4(LTE4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
巨噬炎癥因子1β 抗原相思根瘤菌猴纖維連接su相關(guān)抗原(FRA)elisa定量檢測(cè)試劑盒
CD122/白介su2受體β鏈抗原菌猴細(xì)絲蛋白Cγ(FLNC)elisa定量檢測(cè)試劑盒
巨噬炎癥蛋白2抗原波多野氏微桿菌猴過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)elisa定量檢測(cè)試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白mei13抗原腓特烈斯堡分枝桿菌猴胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)elisa定量檢測(cè)試劑盒
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒微量法可溶性間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒Anti-MAPK11 Antibody神經(jīng)調(diào)節(jié)肽VGF
顆粒體蛋白(GRN)試劑盒Anti-MAPK13 Antibody(PB0787)T負(fù)調(diào)節(jié)蛋白
葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 Anti-MAPK14(P38) Antibody魚、青鳉魚卵黃蛋白原
乙脫氫酶1(ADH1)試劑盒 Anti-MAPK14(P38) Antibody血管假性血友病因子/血管性血友病因子
鳥苷酸激酶1(GUK1)試劑盒 Anti-MAPK6 Antibody血管內(nèi)皮粘附分子
瘦su受體(LEPR)試劑盒Anti-MAPK6 Antibody(PB0706)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子
髓分化因子88(MYD88)試劑盒Anti-MAPK3 Antibody血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1