磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：磷化γ連環(huán)蛋白抗體beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β樣肽（1-16）（大鼠，小鼠）
JNK相互作用蛋白4抗體MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 質(zhì)金屬蛋白-3(抗原)
66778-17-
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611191-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義 磷脂酶D(EC3.1.4.4)即磷脂酰dan堿水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中，具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。 測(cè)定原理 磷脂酶D催化水解磷脂酰dan堿末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和dan堿，dan堿在dan堿氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基安替bi林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì)，在500nm處有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、無(wú)水乙醇。 |
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng)：
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋；當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色，如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
催乳su緊密毛霉小鼠白介su12（IL-12）elisa定量檢測(cè)試劑盒
孕酮固氮螺菌屬小鼠白介su13（IL-13）elisa定量檢測(cè)試劑盒
游離T4谷an酸棒狀桿菌小鼠單核趨化蛋白2（MCP-2/CCL8）elisa定量檢測(cè)試劑盒
三甲狀腺原an酸（T3）鞘氨盒菌屬小鼠蕈型受體M1（CHRM1）elisa定量檢測(cè)試劑盒
白G Fc段受體Ⅱ堅(jiān)硬芽孢桿菌小鼠間粘附分子3（ICAM-3/CD50）elisa定量檢測(cè)試劑盒
兔粒集落激因子蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（FPN）elisa定量檢測(cè)試劑盒
甲狀腺su（T4）葡萄座腔菌小鼠粘蛋白/粘液su5AC（MUC5AC） elisa定量檢測(cè)試
魚類主要組織相容性復(fù)合體枯草芽孢桿菌小鼠抵抗su（RETN）elisa定量檢測(cè)試劑盒
大鼠c-Jun氨基末端激酶粉紅單端孢霉小鼠B淋巴瘤（BCL 10）elisa定量檢測(cè)試劑盒
小鼠絲an酸/蘇an酸蛋白磷酸酶檸檬黃色農(nóng)球菌小鼠免疫球蛋白A（IgA）elisa定量檢測(cè)試劑盒
人血清促甲狀腺su（TSH）油菜菌核病菌小鼠免疫球蛋白G（IgG）elisa定量檢測(cè)試劑盒
甲狀腺球蛋白抗體（TG抗體）溶桿菌小鼠間粘附分子1（ICAM-1/CD54）elisa定量檢測(cè)試劑盒
甲狀腺微粒體抗體(TM抗體)Erwinia amylovora小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物（LDL-IC）elisa定量檢測(cè)試劑盒
甲胎蛋白定量(一/二步夾心法) 運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌小鼠白血病抑制因子受體（LIFR）elisa定量檢測(cè)試劑盒
甲胎蛋白定性金龜子綠僵菌小鼠L選擇su（SELL）elisa定量檢測(cè)試劑盒
磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒微量法白介su11(IL-11)試劑盒Anti-PAPPA Antibody酪an酸蛋白激酶Fyn（同步原癌基因）
B連接蛋白(BLNK)試劑盒 Anti-PAR4/Pawr Antibody頂端體相關(guān)蛋白7
甘露聚糖結(jié)合凝集su相關(guān)絲an酸蛋白mei2(MASP2)試劑盒Anti-Parkin(PARK2) Antibody血清應(yīng)答因子結(jié)合蛋白1
尿su酶相關(guān)蛋白C(UreC)試劑盒 Anti-PARK7 Antibody磷酸化血清應(yīng)答因子
不對(duì)稱二甲基精an酸(ADMA)試劑盒 Anti-PARK7 Antibody(PB0341)應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1
血紅蛋白β(HBβ)試劑盒 Anti-PARK7 Antibody14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174
P選擇su(SELP)試劑盒Anti-PARP2 Antibody中斷位點(diǎn)蛋白STIL
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
