產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
貨號:BJ-016114-1
檢測方法:微量法
產(chǎn)品分類:輔酶Ⅰ系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月
本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
商品介紹:
測定意義: MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。 測定原理: NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
轉(zhuǎn)化酸性卷曲含蛋白質(zhì)2秦氏蜜環(huán)菌PK-15(豬腎)
小鼠抗促甲狀腺素抗體草生毛霉HCT 116(人結(jié)腸癌)
腦源性tau蛋白激酶抗體芽孢桿菌屬LoVo(人大腸癌)
破傷風(fēng)素重鏈抗體龍舌蘭盤孢HIC(人小腸癌)
酮基移換酶樣蛋白1抗體鏈孢囊菌Lec1(倉鼠卵巢)
膜型絲蛋白酶2抗體黑曲霉小鼠骨髓間充質(zhì)干(EGFP標(biāo)記)
抑癌蛋白TCHP抗體玫瑰暗黃鏈霉菌HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮系
T急性淋巴性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗體地中海中慢生根瘤菌*LLC(小鼠肺癌)
胚胎干相關(guān)蛋白TXNDC9抗體扣囊復(fù)膜孢酵母ME-180(人頸表皮癌)
轉(zhuǎn)錄因子9抗體鼠李糖乳桿菌HT-1080(人纖維肉瘤)
轉(zhuǎn)錄因子THOC2抗體紅城紅球菌GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌)
β4抗體根瘤菌HuH-7(人肝癌)
轉(zhuǎn)移生長因子β3(TGFβ3)抗體熱帶假絲酵母DH82(犬巨噬)
轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)抗體大腸埃希氏菌定量質(zhì)控菌株*GBC-SD(人膽囊癌)
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)抗體群結(jié)腐霉ES-2(人卵巢透明癌)
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒微量法促生長釋放(GHRH)試劑盒 Anti-CHRM2 Antibodyp53激活蛋白2
金屬硫蛋白1E (MT1E)試劑盒Anti-CHRM2 Antibody蛋白酶調(diào)解因子10
乙脫氫酶1(ADH1)試劑盒 Anti-CHRM2 Antibody環(huán)指蛋白3
碳酸酐酶II(CA2)試劑盒Anti-CHRNA1 Antibody酮酸脫氫酶激酶亞型2
甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒Anti-CHRNA3 AntibodyRho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1
基質(zhì)金屬蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)試劑盒Anti-CHRNA1 Antibody豬瘟病
二肽基肽酶VI (DPP6)試劑盒 Anti-CHRM3 Antibody腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1