NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品：磷化荷爾蒙敏感脂肪抗體Wnt3a/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt3a抗體IgG
磷化組蛋白H1.4抗體WNT5A/FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)通路Wnt5a抗體IgG
意大利青F. solani RFLP基因分析試劑盒
鼠李糖:6155-35-7Helicobacter pylori RFLP基因分析試劑盒
環(huán)黃芪
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測(cè)試盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-016114-2 |
商品介紹:
測(cè)定意義： MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。 測(cè)定原理： MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng)：
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋；當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色，如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
硫氧還蛋白5抗體北方蜜環(huán)菌IBRS-2（豬腎）
擴(kuò)張型心肌病蛋白1G抗體冷溫木拉克酵母HEC-1-A（人內(nèi)膜腺癌）
TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1抗體乳狀原孢酵母EL4（小鼠淋巴瘤）
端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體畢赤酵母屬HEC-1-B（人內(nèi)膜腺癌）
腫瘤相關(guān)蛋白抗原L6抗體點(diǎn)柄粘蓋牛肝菌（都不提供）H9c2（2-1） （大鼠心?。?/span>
轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF4抗體殺鮭氣單胞菌日本鮭亞種OK（負(fù)鼠腎小管）
缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1抗體塔賓曲霉HK-2（人腎小管上皮）
Thimet內(nèi)肽酶抗體黑曲霉H4（人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤）
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白3相互作用蛋白1抗體葡萄汁有孢漢遜酵母PC-3（人前列腺癌）
四連接素TN抗體乳酸鏈球菌P388D1（小鼠淋巴樣瘤）
Toll樣受體1抗體熱帶假絲酵母MSTO-211H（人肺癌）
DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體厚垣鐮孢菌HL-60（人早幼粒急性白血?。?/span>
三葉肽因子2抗體鼠李糖乳桿菌FRhK-4（恒河猴胚腎）
端粒結(jié)合蛋白2抗體枯草芽孢桿菌DU 145（人前列腺癌）
形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體米曲霉NRK-52E（大鼠腎小管導(dǎo)管上皮）
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)紫外分光光度法生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)試劑盒Anti-CHRNA3 Antibody蛋白磷酸酶2C
不均一核糖核蛋白U (HNRPU)試劑盒Anti-CHRNA3 Antibody染色質(zhì)組裝因子1P55
骨成型蛋白受體II(BMPR2)試劑盒 Anti-CHRNA4 AntibodyRNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子
原鈣黏素β2(PCDHβ2)試劑盒 Anti-CHRNA5 Antibody磷脂酰脫羧酶PISD
載脂蛋白C2(ApoC2)試劑盒 Anti-CHUK Antibody含patatin樣磷脂酶1
神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒Anti-CIB1 Antibody早幼粒白血病蛋白
粘蛋白4(MUC4)試劑盒Anti-CIC Antibody酪酪肽
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
