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細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，但實(shí)際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。原代細(xì)胞培養(yǎng)越來越多地用作細(xì)胞和分子生物學(xué)的主要工具，那么我們在原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能存在哪些問題呢？一起來學(xué)習(xí)一下吧~
污染：轉(zhuǎn)移主要組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需要注意避免污染。
pH值變化：這可能是由于培養(yǎng)基中的鹽分不正確，細(xì)菌或真菌污染，碳酸氫鹽緩沖液不足，二氧化碳張力不正確等引起的。
粘附性不足（細(xì)胞不貼壁）：培養(yǎng)基中不含附著因子（attachment factors）或附著因子不足，培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基污染，細(xì)胞被yi蛋白酶過度消化等。
生長緩慢：原因包括培養(yǎng)基的pH值變化，必需的促進(jìn)生長的成分/因子耗盡，低污染，試劑儲(chǔ)藏不當(dāng)?shù)取?/span>
細(xì)胞死亡：溫度波動(dòng)，二氧化碳含量過低，在融化和/或冷凍保存過程中細(xì)胞受損，有毒代謝產(chǎn)物濃度增加，培養(yǎng)基中的滲透壓失衡導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低。
沉淀（pH不變）：由于使用了冷凍培養(yǎng)基，在pH不變的培養(yǎng)基中可能會(huì)出現(xiàn)沉淀，殘留的磷酸鹽殘留在用洗滌劑洗滌時(shí)可能會(huì)沉淀出粉末狀的培養(yǎng)基成分。
細(xì)胞結(jié)塊（細(xì)胞不貼壁且結(jié)塊）：懸浮細(xì)胞可能由于鈣、鎂離子的存在（貫流時(shí)應(yīng)使用不含鈣、鎂離子的D-Hank’s緩沖液（D-HBSS），而不能選擇含有鈣、鎂離子的HBSS或可能含有鈣、鎂離子的PBS緩沖液）或細(xì)胞裂解及DNA釋放（過度用蛋白水解酶消化）而結(jié)塊。
誘導(dǎo)變異性：多種試劑和培養(yǎng)基會(huì)誘導(dǎo)原代細(xì)胞的數(shù)據(jù)產(chǎn)生變異，研究者的處理手法也可能導(dǎo)致原代細(xì)胞的數(shù)據(jù)產(chǎn)生變異。
以上就是關(guān)于原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能存在哪些問題的解答，如果你想了解更多請咨詢百奧創(chuàng)新客服哦~