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一、荷蘭Locsense 公司

Locsense成立于2015年，是特溫特大學(xué)的一家衍生公司。通過(guò)提供體外測(cè)試的阻抗譜/TEER測(cè)量設(shè)備，我們有助于減少和替代藥物開(kāi)發(fā)和化妝品的動(dòng)物測(cè)試。我們的產(chǎn)品在與傳統(tǒng)工作流程相結(jié)合的同時(shí)，還可以結(jié)合到傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)平臺(tái)，如微流控芯片、器官芯片或智能孔板。

二、Locsens產(chǎn)品介紹

Artemis跨膜電阻分析儀（阻抗譜/TEER 分析儀）

Locsense 的Artemis阻抗譜/ TEER分析儀能夠?qū)崟r(shí)，無(wú)損傷的監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)，細(xì)胞屏障完整性和細(xì)胞活性，這對(duì)藥物的毒性和功效研究有重大意義。

Artemis是一種自動(dòng)、實(shí)時(shí)、無(wú)標(biāo)記的阻抗/TEER分析儀，為屏障完整性提供了客觀標(biāo)準(zhǔn)。Artemis 儀器使得阻抗/TEER測(cè)量變的簡(jiǎn)單容易，使得細(xì)胞位于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)同時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞屏障的完整性。Artemis可以與細(xì)胞培養(yǎng)插件和微流控芯片，器官芯片兼容。Artemis軟件的直觀友好，適合新用戶(hù)和深入的電阻測(cè)量。

Artemis可實(shí)現(xiàn)無(wú)損傷、半連續(xù)的測(cè)量，當(dāng)細(xì)胞位于培養(yǎng)箱內(nèi)、罩內(nèi)或桌面上時(shí)，Artemis即可運(yùn)行，可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)幾天或其他時(shí)間間隔的阻抗測(cè)量。

Artemis 與傳統(tǒng)的Transwell 板（細(xì)胞培養(yǎng)小室或細(xì)胞培養(yǎng)插件）兼容，智能傳感蓋適合12孔和24孔transwell 板，包括Nunc、Corning、VWR、Greiner等細(xì)胞培養(yǎng)板。

Artemis還通過(guò)擴(kuò)展進(jìn)行流量控制，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)基循環(huán)同時(shí)定期進(jìn)行跨膜電阻測(cè)量。

Artemis 結(jié)合智能傳感蓋和校正工具及電腦檢測(cè)軟件，組成一套高精度的阻抗譜測(cè)量?jī)x器，用于先進(jìn)的2D和3D 細(xì)胞培養(yǎng)中TEER 檢測(cè)，該系統(tǒng)包括以下部分：

1、 Artemis TEER 檢測(cè)儀： Artemis是一種自動(dòng)、實(shí)時(shí)的TEER和阻抗譜測(cè)量?jī)x。Artemis標(biāo)準(zhǔn)配備12個(gè)通道，工作頻率從10 Hz到1 MHz。用戶(hù)友好的軟件允許連續(xù)幾天監(jiān)測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)。將Artemis與SmartSense智能傳感蓋相結(jié)合，用于監(jiān)測(cè)常用transwell板（細(xì)胞培養(yǎng)插件）中的細(xì)胞。SmartSense可與多種細(xì)胞培養(yǎng)小室兼容，包括康寧、VWR、Greiner和NUNC（6孔、12孔或24孔）。此外，德國(guó)SABEU的cellQART細(xì)胞培養(yǎng)小室也與Artemis兼容。上皮或內(nèi)皮細(xì)胞屏障完整性測(cè)量對(duì)于器官芯片研究至關(guān)重要，Locsense提供微流控芯片夾具，將Artemis與器官芯片相連接。

2、 SmartSense 智能傳感蓋

SmartSense配備了12組電極。與電極接觸的部件是可高壓滅菌的。使用對(duì)齊套件將SmartSense與transwell板對(duì)齊。SmartSense連接到Artemis。SmartSense適用于多種帶細(xì)胞培養(yǎng)小室的transwell板（6孔、12和24孔），包括康寧、SABEU、VWR、Greiner Bio和NUNC等。

3、 Calibration tool 校準(zhǔn)工具和控制軟件

SmartCell校準(zhǔn)工具可以連接SmartSense并模擬細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞結(jié)構(gòu)通過(guò)等效電路建模。SmartCell包含多種組件，可通過(guò)隨附的連接器輕松連接。用于驗(yàn)證Artemis 和SmartSense性能并模擬細(xì)胞培養(yǎng)。

Artemis 阻抗譜/TEER檢測(cè)系統(tǒng)的特點(diǎn)：

w 無(wú)交叉污染

w 無(wú)標(biāo)記，無(wú)損檢測(cè)

w 無(wú)振動(dòng)

w 減少工作量

w 電極位置準(zhǔn)確提供可靠的結(jié)果

w 與標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)小室兼容

三、Locsense Artemis應(yīng)用領(lǐng)域和應(yīng)用實(shí)例：

Artemis 用于TEER 檢測(cè)和阻抗譜測(cè)量，主要用于細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域，Artemis的特點(diǎn)在于它的智能工作流程、靈敏度和靈活性。LocaSense為定量細(xì)胞屏障測(cè)量提供了完整解決方案。例如用于3D皮膚構(gòu)建體、腸道組織和心肌細(xì)胞研究等。

1、腸道類(lèi)器官

Artemis用于研究腸道的2D類(lèi)器官。類(lèi)器官培養(yǎng)在常規(guī)12孔細(xì)胞培養(yǎng)插件中。使用Artemis在大約3周的時(shí)間內(nèi)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)箱中類(lèi)器官的生長(zhǎng)。利用這一類(lèi)器官腸道模型，研究了食物對(duì)腸道激素排泄的影響。Artemis根據(jù)以下要求進(jìn)行TEER/阻抗測(cè)量：

w 12孔板的TEER檢測(cè)

w 可調(diào)整固定測(cè)量時(shí)間間隔

w 運(yùn)行時(shí)間至少3周

w 細(xì)胞培養(yǎng)液循環(huán)中的流量可調(diào)

w 流量可以根據(jù)TEER測(cè)量結(jié)果定時(shí)進(jìn)行調(diào)整

2、腸組織模型

TNO開(kāi)發(fā)了一種與生理相關(guān)的腸道組織模型，稱(chēng)為InTESTin 細(xì)胞屏障芯片（IBC）。IBC模型允許研究藥物、生物和營(yíng)養(yǎng)物跨腸壁的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)毒性。

為了監(jiān)測(cè)腸內(nèi)IBC的屏障完整性，TNO使用定制設(shè)計(jì)的4個(gè)芯片的芯片夾具測(cè)試Artemis。LocaSense支持TNO 的實(shí)時(shí)TEER測(cè)量，并開(kāi)發(fā)Artemis和芯片夾具的半定制解決方案。

3、3D 皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的監(jiān)測(cè)

在Radboud大學(xué)的醫(yī)學(xué)中心合作，實(shí)現(xiàn)3D皮膚細(xì)胞培養(yǎng)物屏障完整性的阻抗測(cè)量。阻抗測(cè)量是在將Artemis連接到24孔智能傳感蓋和NUNC transwell板進(jìn)行的。使用Artemis可以監(jiān)測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)變化包括：

w 細(xì)胞培養(yǎng)物的屏障完整性

w 三名患者皮膚細(xì)胞之間的區(qū)別

w 損傷對(duì)皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的影響

4、 腸類(lèi)器官

與阿姆斯特丹UMC合作研究腸上皮干細(xì)胞衍生的3D模型。采用阻抗譜研究細(xì)胞培養(yǎng)插件中腸道類(lèi)器官中單層完整性。TEER（跨上皮電阻）是衡量單層發(fā)育階段和完整性的指標(biāo)，很容易地從阻抗譜中獲得。Artemis用于單層完整性測(cè)量的優(yōu)勢(shì)是減少重復(fù)性工作、增加可靠性和節(jié)省時(shí)間。

5、 心肌細(xì)胞構(gòu)建的TEER監(jiān)測(cè)

薩克森應(yīng)用科學(xué)大學(xué)使用Artemis（測(cè)量跳動(dòng)的hiPSC衍生心肌細(xì)胞（hiPSC-CMs）的活性。通過(guò)ARTEMIS提供的時(shí)間分辨率，可以監(jiān)測(cè)hiPSC CMs收縮的頻率以及峰值的形狀。

6、 肺細(xì)胞的監(jiān)測(cè)

特溫特大學(xué)的生物材料科學(xué)和技術(shù)小組使用LocaSense Artemis監(jiān)測(cè)不同類(lèi)型膜上肺細(xì)胞的生長(zhǎng)，膜是在自己制造不同孔徑的膜，測(cè)量結(jié)果獲得細(xì)胞培養(yǎng)的適合孔徑。并將自己制造的膜的性能與市售膜的性能進(jìn)行了比較。