濟南高壓滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi),通過加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力,從而使沸點增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時,滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當(dāng)水蒸汽中含有空氣時,在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更。
濟南高壓滅菌的流程:
1、排冷階段
抽真空排冷兩到三次,這種抽真空的做法是采用的脈動真空滅菌技術(shù)而來的。先用真空泵抽凈滅菌鍋內(nèi)的冷空氣,然后通入蒸汽,再次抽真空,如此重復(fù)操作兩到三次,一共30分鐘左右。
2、一計時階段
排凈冷空氣后進入升溫階段,當(dāng)滅菌鍋內(nèi)溫度達到105℃時,維持20分鐘。
3、二計時階段
一階段結(jié)束后繼續(xù)升溫,當(dāng)滅菌鍋內(nèi)溫度到達115℃時,維持20分鐘。
4、三計時階段
二階段結(jié)束后繼續(xù)升溫,當(dāng)滅菌鍋內(nèi)溫度到達121℃時,維持90-120分鐘。
5、降壓階段
三階段結(jié)束后,滅菌鍋所有閥門處于關(guān)閉狀態(tài),滅菌鍋壓力和溫度開始下降,20分鐘后,開始排氣,準(zhǔn)備出鍋。
濟南高壓滅菌的注意事項:
1、汽未放盡前,不得開啟高壓鍋;
2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開,切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時,不能過快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從培養(yǎng)容器中溢出。
4、操作過程,請注意安全,小心燙傷。