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計數(shù)辦法的驗證當樹立產(chǎn)品的微生物限度儀查看法時，應進行檢定、霉菌及酵母菌計數(shù)辦法的驗證，以確認所選用的辦法適合于該產(chǎn)品、霉菌及酵母菌數(shù)的測定。若產(chǎn)品的組分或原查驗條件產(chǎn)生改動或許影響查驗成果時，計數(shù)辦法應重新驗證。驗證時，按供試液的制備、霉菌及酵母菌計數(shù)所規(guī)矩的辦法及下列要求進行。對各實驗菌的收回率應逐個進行驗證。菌種及菌液制備同計數(shù)培養(yǎng)基的適用性查看驗證辦法驗證實驗至少應進行3次獨立的平行實驗，并分別計算各實驗菌每次實驗的收回率。

　　（1）實驗組 平皿法計數(shù)時，取實驗或許用的稀釋級供試液1ml 和50～100cfu 實驗菌，分別注入平皿中，立即傾瀉瓊脂培養(yǎng)基，每株實驗菌平行制備2個平皿，按平皿法測定其菌數(shù)。薄膜過濾法計數(shù)時，取規(guī)矩量實驗或許用的稀釋級供試液，過濾，沖刷，在一 次的沖刷液中參加50～100cfu 實驗菌，過濾，按薄膜過濾法測定其菌數(shù)。
　?。?/span>2）菌液組 測定所加的實驗菌數(shù)。
　?。?/span>3）供試品對照組 取規(guī)矩量供試液，按菌落計數(shù)辦法測定供試品本底菌數(shù)。
　?。?/span>4）稀釋劑對照組 若供試液制備需要渙散、乳化、中和、離心或薄膜過濾等特殊處理時，應添加稀釋劑對照組，以考察供試液制備過程中微生物受影響的程度。實驗時，可用相應的稀釋液代替供試品，參加實驗菌，使菌濃度為每1ml 供試液含50～100cfu，按實驗組的供試液制備辦法和菌落計數(shù)辦法測定其菌數(shù)。成果判別在3次獨立的平行實驗中，稀釋劑對照組的菌收回率（稀釋劑對照組的均勻菌落數(shù)占菌液組的均勻菌落數(shù)的百分率）應均不低于70%。若實驗組的菌收回率（實驗組的均勻菌落數(shù)減去供試品對照組的均勻菌落數(shù)的值占菌液組的均勻菌落數(shù)的百分率）均不低于70%，照該供試液制備辦法和計數(shù)法測定供試品、霉菌及酵母菌數(shù)；若任一 次實驗中實驗組的菌收回率低于70%，應選用培養(yǎng)基稀釋法、離心沉淀法、薄膜過濾法、中和法等辦法或聯(lián)合使用這些辦法消除供試品的抑菌活性，偏重新進行辦法驗證。
　　若沒有適合的辦法消除供試品中的抑菌作用，那么驗證實驗中微生物收回的失利可看成是因供試品的活性引起的，同時表明該供試品不能被實驗菌污染?？墒?，供試品也或許僅對實驗用菌株具有抑制作用，而對其他菌株沒有抑制作用。因此，依據(jù)供試品須契合的微生物限度儀規(guī)范和菌數(shù)報告規(guī)矩，在不影響查驗成果判別的前提下，應選用能使微生物成長的更高稀釋級的供試液進行辦法驗證實驗。若驗證實驗契合要求，應以該稀釋級供試液作為稀釋級的供試液進行供試品查驗。計數(shù)辦法驗證時，選用上述辦法若還存在一株或多株實驗菌的收回率達不到要求，那么挑選收回情況，挨近要求的辦法和實驗條件進行供試品的查驗。