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histon-H2b試劑盒標(biāo)本激活方法:
1. 將450ul 標(biāo)本稀釋液加入到一支 1.5ml 進(jìn)口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標(biāo)本。
2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊,上下混勻。 2 - 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。
3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊,上下混勻。
4. 即用,或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計(jì)算結(jié)果時(shí)乘 以稀釋倍數(shù) 50 。
5. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標(biāo)本稀釋液+ 50ul 樣本+ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。
結(jié)果計(jì)算與判斷
1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。
2. 以標(biāo)準(zhǔn)品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo), OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) E2F1 含量 ,再乘上稀釋倍數(shù)即可 。
試劑盒性能
1. 靈敏度 : 最小的E2F1 檢測(cè)濃度小于 15 pg/ml。
2. 特異性: 可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。
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