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顯微鏡的物鏡

   2008年09月03日 09:16  

學(xué)系統(tǒng)的主要構(gòu)件是物鏡和目鏡,其任務(wù)是完成金相組織的放大,并獲得清晰的圖像.

.物鏡的類(lèi)型
     物鏡的優(yōu)劣直接影響顯微鏡成象的質(zhì)量,這與象差的校正有關(guān),因此,物鏡是根據(jù)象差校正的程度分類(lèi)的.在*透鏡成象的象差分晰中已知:對(duì)映象質(zhì)量影響zui大的是球面差、色差和象場(chǎng)彎曲,前二項(xiàng)對(duì)映象中央部分的清晰度有很大影響,而彎場(chǎng)彎曲對(duì)攝影邊緣部分有極大影響。如下表是按象差校正程度分類(lèi)的顯微鏡物鏡。
   顯微鏡物鏡及象差校正程度      
物鏡
球差
色差
象場(chǎng)彎曲
消色差物鏡
黃綠波區(qū)校正
紅綠波區(qū)校正
存在
復(fù)消色差物鏡
綠、紫波區(qū)校正
紅綠紫區(qū)校正
存在
半復(fù)消色差物鏡
多個(gè)波區(qū)校正
多個(gè)波區(qū)校正
存在
平面消色差物鏡
黃綠波區(qū)校正
紅綠波區(qū)校正
已校正
平面復(fù)消色差物鏡
綠紫波區(qū)校正
紅綠紫區(qū)校正
已校正
消象散物鏡
已校正
已校正
已校正
      這里,就常用的幾種物鏡特性說(shuō)明如下。
      1)消色差及平面消色差物鏡
       這兩種物鏡球差色差的校僅為黃、綠、二個(gè)波區(qū),仍然存在其他波區(qū)的球差和色差,因而映象不有得到各色彩間的真實(shí)關(guān)系,當(dāng)焦點(diǎn)變動(dòng)時(shí)可以看到殘余的色差。但一般低倍放大時(shí)影響不大。鑒于其黃綠波區(qū)校正較佳,使用時(shí)宜以黃綠光作為照明光源,或在入色、紅色濾光片,以免顯著暴露未校正的色差。
      消色左物鏡常與福根目鏡或校正目鏡相配合,用于低倍、中倍放大。因其結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單,映象中央部分象差大致可以校正,價(jià)格又低,故應(yīng)用較多。一般臺(tái)式顯微鏡物鏡多屬此類(lèi)。
      平面消色差物鏡對(duì)象場(chǎng)彎曲作了進(jìn)一步校正,因此投象平直,使視域邊緣與中心能同時(shí)清晰成象。所以適于金相顯微鏡攝影。
      2)復(fù)消色差物鏡及平面復(fù)消色差物鏡
       復(fù)消色差物鏡是由多組透鏡組合而成的。色差的校正實(shí)際上等于可風(fēng)光的全部波區(qū),但部分放大率色差仍然存在。當(dāng)其與福根目鏡或其它簡(jiǎn)單組合目鏡配用時(shí),這些殘存的色差會(huì)使映像邊緣略帶色彩。因此,需要與補(bǔ)償型目鏡配合使用。復(fù)消色差物鏡對(duì)于光源無(wú)任何限制,白光照明也可得到良好的效果。若加入藍(lán)色或黃色濾光片效果更佳。它是顯微鏡中*良的一種物鏡。
      平面消色差物鏡除進(jìn)一步作象彎曲的校正外,其它象差校正程度與復(fù)消色物鏡相同。使用復(fù)消色差物鏡造象的平坦程度不如消色差物鏡,而平面復(fù)消色段物鏡可使映象清晰、平坦、進(jìn)一步提高成象質(zhì)量。
      3)半復(fù)消色差物鏡
       就象差校正程度而言,半復(fù)消色差物鏡介于消色差與復(fù)消色差物鏡之間,但其它光學(xué)性質(zhì)都與復(fù)消色差物鏡接近。其售價(jià)較低廉,常用來(lái)替代復(fù)消色差物鏡,使用時(shí)能與補(bǔ)償型目鏡相配合。
       此外,尚有特殊用途的高溫反射物鏡,折反型物鏡、紫外線(xiàn)物鏡等,都在各顯微鏡中有專(zhuān)述。
       2.物鏡的性質(zhì)
       1)物鏡的數(shù)值孔徑
        物鏡的數(shù)值孔徑表征物鏡的聚光能力,是物鏡的重要性質(zhì)之一,增強(qiáng)物鏡的聚光能力可提高物鏡的鑒別率。
        數(shù)值孔徑通常以符號(hào)“N.A.”表示(即Numerical Aperture)。根據(jù)理論的推導(dǎo)得出:
N.A.=n.sinu
式中    n──物鏡與觀(guān)察之間介質(zhì)的折射率;
            u──物鏡的孔徑半角
       因此,有兩個(gè)提高數(shù)字孔徑的途徑:
       a)增大透鏡的直徑或減少物鏡的焦距,以增大孔徑半角u。此法因?qū)е孪蟛钤龃蠹爸圃炖щy,實(shí)際上sinu的zui大值只能達(dá)到0.95
       b)增加物鏡與觀(guān)察之間的折射率n。是介質(zhì)對(duì)物鏡數(shù)值孔徑影響示意圖。當(dāng)光線(xiàn)沿光軸方向射向觀(guān)察物時(shí),自物體S處發(fā)出的反射光除沿SO方向反射外,尚有(SS1)(S2,S2)等衍射光。(a)是以空氣為介質(zhì)(又稱(chēng)干系物鏡)的情況,只有(SS1)內(nèi)的衍射光可以通過(guò)物鏡,(SS1)以外的衍射光如(S2,S2)均不能通過(guò)物鏡。(b)是物鏡與觀(guān)察之間以松柏油或其它油為介質(zhì)(又稱(chēng)油浸物鏡)時(shí),由于折射率n增加,使衍射光的角度變狹,致使(S2,S2)甚至(S3S′3)內(nèi)的衍射光均可通過(guò)物鏡。因而使物鏡通過(guò)盡可能多的衍射光束,利于鑒別組織細(xì)節(jié)。
       在相同介質(zhì)中,波長(zhǎng)短的光源將有較大的折射率。同理,也將有較多的衍射光束進(jìn)入物鏡。
       一般高倍物鏡常設(shè)計(jì)為油鏡。油鏡是按某一介質(zhì)特別設(shè)計(jì)的,因此應(yīng)按介質(zhì)使用。zui常用的介質(zhì)是松柏油(n=1.515),其zui大數(shù)值孔徑N.A=1.40;用a-壹代溴萘為介質(zhì),n=1.658,zui高數(shù)值孔徑可達(dá)1.60。
       2)物鏡的鑒別率及顯微鏡的有效放大倍數(shù)
        物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個(gè)物點(diǎn)清晰分辨的zui大能力,以?xún)蓚€(gè)物點(diǎn)能清晰分辨的zui小距離d的倒數(shù)表示。d愈小,表示物鏡的鑒別率愈高。
        要明白鑒別率可以有一定的限度,這就要用光通過(guò)透鏡后產(chǎn)生衍射現(xiàn)象來(lái)解釋。物體通過(guò)光學(xué)儀器成象時(shí),每一物點(diǎn)對(duì)應(yīng)有一象點(diǎn),但由于光的衍射,物點(diǎn)的象不再是一個(gè)幾何點(diǎn),而是有一定大小的衍射亮斑??拷膬蓚€(gè)物點(diǎn)所成的象一兩個(gè)亮斑如果互相重疊,則導(dǎo)致這兩個(gè)物點(diǎn)分辨不清,從而限制了光學(xué)系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)一分辨率。顯然,象面上衍射圖象中央亮斑半徑愈大,系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)愈小。
        如何確定物鏡的極限分辨率,這可由物點(diǎn)A1、A2通過(guò)透鏡后的衍射進(jìn)行分析。A1、A2為物點(diǎn)A1、A2的衍射圖象,呈同心環(huán)狀。中心的光線(xiàn)強(qiáng)度zui大,衍射環(huán)的光強(qiáng)度隨環(huán)直徑的增加而逐漸減弱。
       瑞利(Rayleigh)提出一個(gè)推測(cè)(又稱(chēng)瑞利準(zhǔn)則):認(rèn)為當(dāng)A1衍射花樣的*極小值正好落在A2衍射花樣的極大值時(shí),A1、A2是可以分辨的,將此時(shí)定出的兩物點(diǎn)距離A1、A2作為光學(xué)統(tǒng)的分辨極限。θ0稱(chēng)為極限分辨角。不言而喻,當(dāng)θθ0時(shí)是*可分辨的,θθ0時(shí)是不可分辨的。
        由圓孔衍射理論得到:θ0=1.22λ / D
        式中λ──入射光波長(zhǎng);
               D──入射光的zui大允許孔徑(透鏡直徑)。
        因?yàn)?/span>θ0很小,所以由圖2-4得:
                                                               d′≈θ0=1.22λS / D
        物鏡在設(shè)計(jì)時(shí),總是使它滿(mǎn)足阿貝正弦條件的,即
                                                              ndsinu=n′d′sinu′
式中nn′為物、象所在空間的折射率,成象總是在空氣介質(zhì)中,故n′=1;u各u′分別為光線(xiàn)在物、象空間共軛點(diǎn)上的孔徑角;d和d′分別為物點(diǎn)、象點(diǎn)中心斑的間距。
    考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光,有傾斜光線(xiàn),對(duì)上式系數(shù)作適當(dāng)?shù)男拚?,所以式中nsinu就是物鏡的數(shù)值孔徑,因此,上式或者寫(xiě):d=0.5λ  /N.A
    因此表明:物鏡的數(shù)值孔徑愈大,入射光的波長(zhǎng)愈短,則物鏡的分辨能力愈高。在可見(jiàn)光中,觀(guān)察時(shí)常用黃綠光(λ ≈4400A),則可使分辨能力提高25%左右。
    對(duì)于光學(xué)金相顯微鏡,若用藍(lán)色光,采用油浸物鏡,那么物鏡的zui大分辨能力約為1600A。
        金相顯微鏡的鑒別率zui高只能達(dá)到物鏡的鑒別率,故物鏡的鑒別率又可稱(chēng)為顯微鏡的鑒別率。因?yàn)槟跨R是不能進(jìn)一步增大整個(gè)光學(xué)系統(tǒng)鑒別率的,它zui多不過(guò)是用來(lái)保證物鏡鑒別率的充分利用。若想進(jìn)一步提高顯微鏡的鑒別率應(yīng)采用更短波長(zhǎng)的電子波,這就是電子顯微鏡。
        在顯微鏡中保證物鏡的鑒別率充分利用時(shí)所對(duì)應(yīng)的顯微鏡的放大倍數(shù),稱(chēng)為顯微鏡的有效放大倍數(shù)。有效放大倍數(shù)可由以下關(guān)系推出:人眼在明視距離(250mm)處的分辨能力為0.15~0.30,因此,需將物鏡鑒別的距離d經(jīng)顯微鏡放大后成0.15~0.30mm方能被人眼分辨。若以M表示顯微鏡的放大倍數(shù),則
d.m=0.15~0.30
M=0.15~0.30 / d=(0.15~0.30)(N.A.) / 0.5λ =0.3~0.6 N.A. / λ
此時(shí)的放大倍數(shù)即為顯微鏡的有效放大倍數(shù),通常以M有效表示。因此
M有效=0.3~0.6N.A. / λ
由此可知:顯微鏡的有效放大倍數(shù)由物鏡的數(shù)值孔徑及入射光波長(zhǎng)決定。已知有效放大倍數(shù)就可以正確選擇物鏡和目鏡的配合,以充分發(fā)揮物鏡的鑒別能力而又不致造成虛放大。
        例如:選用N.A.=0.65的32×物鏡,
                    當(dāng)λ=5500A時(shí),
                                               M有效=(500~1000)N.A.=325~650×
因此,應(yīng)選擇10~20倍的目鏡配用。如果目鏡的倍數(shù)低于10倍,未充分發(fā)揮物鏡的鑒別能力;如果目鏡的倍數(shù)高于20倍,將會(huì)造成虛放大,仍不能顯示物鏡鑒別率的微細(xì)結(jié)構(gòu)。
         (3)垂直鑒別率
          垂直鑒別率又稱(chēng)景深,定義為在固定相點(diǎn)的情況下,成象面沿軸向移動(dòng)仍能保持圖象清晰的范圍。表征物鏡對(duì)應(yīng)位于不同平面上目的物細(xì)節(jié)能否清晰成象的一個(gè)性質(zhì),垂直鑒別率的大小由滿(mǎn)意成象的平面的兩個(gè)極限位置(位于聚焦平面之前和之后)間的距離來(lái)量度。
         如果人跟分辨能力為0.15~0.30mm,n為目的物所在介質(zhì)的折射率,(N.A.)為物鏡的數(shù)值孔徑,M為顯微鏡的放大倍數(shù),則垂直鑒別率h可由下式求出:
h=n / (N.A.).M ×(0.15~0.30)mm
由上式可知:如果要求較大的垂直鑒別率,選用數(shù)值孔徑小的物鏡,或減少孔徑光闌以縮小物鏡的工作孔徑,這樣就不可避免降低了顯微鏡的分辨能力。這兩個(gè)矛盾因素,只能被具體情況決定取舍。
        (4)物鏡的放大率
         由*章顯微鏡放大原理中可知:物鏡的放大率M=△/F,這表明,在確定了物鏡的焦距(F)以后,放大率隨顯微鏡的光學(xué)鏡筒長(zhǎng)(△)而變化。只有確定了光學(xué)顯微鏡筒長(zhǎng)△以后,物鏡的放大率才有意義。因此,物鏡的放大率是按設(shè)計(jì)的光學(xué)鏡筒長(zhǎng)來(lái)標(biāo)定的,必須在的鏡筒長(zhǎng)度上使用,否則其放大倍數(shù)將改變。
         (5)鏡筒長(zhǎng)度
          物鏡的像差是依據(jù)一定位置的映象來(lái)校正的。如是以光學(xué)鏡筒長(zhǎng)為△時(shí)校正的透鏡成象情況:G(綠光)R(紅光)均成象于O′處,沒(méi)有象差:(a)(c)分別為鏡筒短于及長(zhǎng)于原設(shè)計(jì)時(shí)的情況,使象差復(fù)又呈現(xiàn)。因此,物鏡一定要在規(guī)定的機(jī)械鏡筒長(zhǎng)度的距離,對(duì)的一套光學(xué)儀器是固定不變的。一般顯微鏡的機(jī)械鏡筒長(zhǎng)度多數(shù)為160mm,170mm,190mm,此外,金相顯微鏡在攝影時(shí),由于放大倍率不同,映象投射距離變動(dòng)成象,物鏡的象差均已校正。
         3.物鏡的性能標(biāo)志
         物鏡的主要性能已標(biāo)注在物鏡的外殼上,內(nèi)容包括:
         (1)物鏡類(lèi)型
          國(guó)產(chǎn)物鏡標(biāo)有物鏡類(lèi)別的漢語(yǔ)拼音字頭,如平面消色差物鏡標(biāo)“PC”
          西歐各國(guó)產(chǎn)物鏡多標(biāo)有物鏡類(lèi)別的英文名稱(chēng)或字頭,如平面消色差物鏡標(biāo)以“Plana—pchromatic或PI”,消色差物鏡標(biāo)以“Achromatic”復(fù)消色差物鏡標(biāo)有“Apochromatic”
          (2)放大倍數(shù)
           如標(biāo)以15×,20×,32×,40×等分別表示其放大倍數(shù)為15倍,20倍。32倍,40倍。
         (3)數(shù)值孔徑
           物鏡數(shù)值孔徑的數(shù)值均有直接標(biāo)注,如0.30,0.65,0.95等分別表示物鏡的數(shù)值孔徑為0.30,0.65,0.95
         (4)適用的機(jī)械鏡筒長(zhǎng)度
            如標(biāo)有170mm,190mm,∞/0分別表示物鏡適用的機(jī)械筒長(zhǎng)度為170mm,190mm,無(wú)限長(zhǎng)。
         (5)油浸物鏡
          凡油浸物鏡均有特別標(biāo)志,刻以HI,oil,國(guó)產(chǎn)物鏡刻以“油”或漢語(yǔ)拼音字頭“y”。

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