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ELISA試劑盒對(duì)于剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的新手或者準(zhǔn)備開展ELISA實(shí)驗(yàn)的人員, 又該如何選擇適合且質(zhì)量又可靠的ELISA試劑盒呢?
1. 首先選定ELISA類型
ELISA技術(shù)可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。ELISA方法中有三個(gè)必要的試劑:
(1) 固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2) 酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);
(3) 酶反應(yīng)的底物。
一般可將ELISA分為以下幾種類型,實(shí)驗(yàn)君首先需要根據(jù)自己的待檢物來(lái)確定試劑盒類型。
A、雙抗體夾心法:針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測(cè)抗體。適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子,不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原。同理,也有雙抗原夾心法測(cè)抗體ELISA試劑盒。
B、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一抗,即可測(cè)定抗原總量。此法操作手續(xù)簡(jiǎn)短,因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
C、間接法:間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)來(lái)檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
D、ELISA試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去,或不易得到足夠的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。
2. 認(rèn)清訂購(gòu)渠道
不論是還是國(guó)內(nèi)品牌,都需要在訂購(gòu)前先與生產(chǎn)廠商詳細(xì)溝通產(chǎn)品細(xì)節(jié)(比如酶標(biāo)板是否可拆卸),了解售前售后技術(shù)服務(wù)能力等。然后咨詢訂購(gòu)渠道,比如直接向廠家訂購(gòu)或通過(guò)中國(guó)區(qū)或省級(jí)授權(quán)代理商經(jīng)銷商訂購(gòu)。謹(jǐn)防jiamao產(chǎn)品,花了錢是小事,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性、真實(shí)性是大事呀,耽誤了時(shí)間延遲了畢業(yè)更是不無(wú)處訴苦! 空留傷心淚。選擇正規(guī)渠道,選擇優(yōu)質(zhì)品質(zhì)!早發(fā)高質(zhì)量Paper!
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