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凱氏定氮法測(cè)量粗蛋白實(shí)驗(yàn)中消化樣品的幾個(gè)要點(diǎn)

1 催化劑及其用量

在環(huán)境污染小、價(jià)格便宜、催化效果好的前提下，目前催化劑多為硫酸銅和無(wú)水硫酸鉀( 或無(wú)水硫酸鈉)。其添加量不同公司差異較大，其中硫酸銅: 無(wú)水硫酸鉀( 或無(wú)水硫酸鈉) 主要有1∶9、1∶10、1∶15 和1∶17 等，國(guó)標(biāo)為0.4g 硫酸銅和6g 無(wú)水硫酸鉀( 或無(wú)水硫酸鈉)，比例為1∶12。若添加量加大，消化液易結(jié)塊不易轉(zhuǎn)移；添加量減少，消化時(shí)間加長(zhǎng)或者消化不*。建議大家按國(guó)標(biāo)執(zhí)行為好。亦可根據(jù)自己的經(jīng)驗(yàn)以及試樣的多少、消化的難易程度、蛋白含量的多少自行調(diào)整。

2 硫酸的用量

濃硫酸的用量應(yīng)視試樣的重量、含水量及其所含蛋白高低而適當(dāng)調(diào)整。對(duì)于體積大重量輕的粗飼料、高蛋白飼料或者含水量較高的試樣、淀粉含量多的精料, 應(yīng)適當(dāng)加大濃硫酸的用量，多為15mL 左右。這是由于此類(lèi)樣品，濃硫酸在對(duì)其脫水和碳化是消耗量加大，當(dāng)加入的濃硫酸量不足或者剛剛夠試樣脫水和碳化時(shí)就會(huì)出現(xiàn)燒干現(xiàn)象。反之則需加入10mL 左右。若通風(fēng)柜的排風(fēng)量較大時(shí)應(yīng)適當(dāng)多加濃硫酸2mL 左右，以防止?jié)饬蛩岬恼舭l(fā)而使其濃度降低，試樣消化不*從而導(dǎo)致所測(cè)得的數(shù)值偏低。

3 消化溫度

剛開(kāi)始時(shí)以低溫(200 ～ 300℃ ) 加熱，待試樣焦化泡沫消失后，逐步緩慢提高溫度(360～410℃ )。起初低溫加熱是為防止試樣起泡沫，而溢出燒瓶外或碳化后的顆粒粘附于燒瓶壁，導(dǎo)致消化不*，所測(cè)結(jié)果偏低。對(duì)于富含脂肪或者在消化過(guò)程中易發(fā)泡的樣品，可在消化前滴加少量消泡劑，如辛醇、液體石蠟等。

4 消化時(shí)間

消化時(shí)間也是許多文獻(xiàn)一直在探討的問(wèn)題，也有許多快速消化法的研究。其消化時(shí)間的標(biāo)準(zhǔn)為消化呈透明藍(lán)綠色后，再加熱消化15min。根據(jù)蘇軍等研究表明，消化液澄清后再繼續(xù)消化30min 為宜。此試驗(yàn)只是針對(duì)于蛋白含量低于蠶蛹的樣品，而對(duì)于蛋白含量高于蠶蛹的樣品，如進(jìn)口魚(yú)粉、血粉、羽毛粉等并未進(jìn)行試驗(yàn)性研究。因此我個(gè)人認(rèn)為，可根據(jù)試樣的重量、蛋白含量的多少以及消化的難易程度而適當(dāng)調(diào)整消化液澄清后的消化時(shí)間。對(duì)于所稱(chēng)試樣質(zhì)量較多、蛋白含量高于蠶蛹或者難消化的試樣，消化液澄清后繼續(xù)消化的時(shí)間可控制在45m i n ～ 2h 不等，具體時(shí)間化驗(yàn)工作者可根據(jù)自己的工作經(jīng)驗(yàn)而自行定奪。