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生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備介紹:
1、超凈工作臺(tái)/生物安全柜
細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌要求高的環(huán)境,在進(jìn)行操作細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)時(shí),需要在100級(jí)的空氣下進(jìn)行,那我們就需要購(gòu)買能提供百級(jí)潔凈度的超凈工作臺(tái)或生物安全柜了。
2、二氧化碳培養(yǎng)箱
細(xì)胞培養(yǎng)所用的緩沖體系是*+HEPES體系,所以需要二氧化碳提供緩沖能力維持pH。這時(shí)我們就需要一個(gè)二氧化碳培養(yǎng)箱來對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。并且由于二氧化碳培養(yǎng)箱通常不具有制冷壓縮機(jī),所以需要用戶確定其細(xì)胞房?jī)?nèi)在夏天也有全天候的空調(diào)制冷,否則會(huì)造成箱內(nèi)溫度超標(biāo)。
3、倒置顯微鏡
需要倒置顯微鏡的幫助。對(duì)于一些熒光免疫細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(IF),則還需要購(gòu)買倒置的熒光顯微鏡。
4、純水機(jī)/超純水機(jī)
細(xì)胞培養(yǎng)還需要超純水系統(tǒng),普通的純水和蒸餾水是無法用于細(xì)胞培養(yǎng)的,而超純水主要用于配置一些培養(yǎng)基和試劑,超純水的進(jìn)水可為自來水或二級(jí)純水(質(zhì)量好些的去離子水,電阻10兆歐左右)。
5、移液槍,電動(dòng)移液槍
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作時(shí),需要使用各種吸頭及移液管,所以配置移液槍是必要的。
6、離心機(jī)
細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,一般轉(zhuǎn)速在1000轉(zhuǎn)到1500轉(zhuǎn)之間,所以需要購(gòu)買低轉(zhuǎn)速的常溫離心機(jī),而且要帶10ml,50ml及培養(yǎng)板的轉(zhuǎn)子。另外還需要一臺(tái)高速冷凍離心機(jī)用于收集細(xì)胞沉淀或細(xì)胞上清。
赫西分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室臺(tái)式低速離心機(jī)TDZ5
7、低溫冰箱
細(xì)胞在凍存時(shí)需要存放-70到-80度過夜再放入液氮罐,這樣則需要一個(gè)低溫冰箱。
8、傳遞窗
細(xì)胞房在構(gòu)建時(shí)要與外界隔絕,這樣就需要購(gòu)買傳遞窗來傳遞物品,減少污染的幾率,并且將所有進(jìn)入細(xì)胞室的物品都在傳遞窗內(nèi)進(jìn)行紫外殺菌,可以保證潔凈室的安全。
9、高壓滅菌鍋
各類細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室器皿在使用前后都需要做滅菌處理,滅菌條件一般為121℃,20~30分鐘,這樣就需要一臺(tái)放置在潔凈室外的高壓滅菌鍋來保障生物安全性。
10、細(xì)胞培養(yǎng)中需要的各種耗材
各類細(xì)胞培養(yǎng)板,細(xì)胞培養(yǎng)瓶,平皿移液管等。
11、其余儀器
對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)還可能需要振蕩器及磁力攪拌器用于混勻液體;還有一些沾滿細(xì)胞的難清洗的不銹鋼類或玻璃類器皿,則需要超聲波清洗機(jī)的幫助;如果涉及免疫實(shí)驗(yàn),肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的話,則需要購(gòu)買制冰機(jī);另外破碎細(xì)胞可能會(huì)需要超聲波細(xì)胞破碎儀;后需提及的是如果細(xì)胞房較大,則要配備手推車。
12、液氮罐
建立一個(gè)細(xì)胞庫(kù),液氮罐就是必須的,放入液氮罐內(nèi)的凍存細(xì)胞一般可以保證在近十年的時(shí)間內(nèi)都具有生物活性,至于需要多大的液氮罐要根據(jù)細(xì)胞庫(kù)的大小而定。
實(shí)驗(yàn)室高速冷凍離心機(jī)樣品前處理設(shè)備3H16RI
接下來我們重點(diǎn)介紹一下離心機(jī):
離心機(jī):離心是研究如細(xì)胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體,以及各種大分子基本手段。離心技術(shù)是研究生物的結(jié)構(gòu)和功能中*的一種物理技術(shù)手段。因?yàn)楦鞣N物質(zhì)在沉淀系數(shù)、浮力、和質(zhì)量等方面有差異,可利用強(qiáng)大的離心力場(chǎng),使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離心機(jī)。離心技術(shù)應(yīng)用廣泛,包括收集和分離細(xì)胞、細(xì)胞器和生物大分子等。
據(jù)其轉(zhuǎn)速的不同,可分為以下幾種類型:
1. 普通低速離心機(jī):大轉(zhuǎn)速小于10000 r/min;
①醫(yī)用或臺(tái)式離心機(jī):是離心機(jī)中簡(jiǎn)單而廉價(jià)的,常用于收集快速沉降系數(shù)的物質(zhì),如紅細(xì)胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細(xì)菌等。
②低速冷凍離心機(jī):主要用于細(xì)胞、細(xì)胞核、細(xì)胞膜和細(xì)菌的沉淀和收集等。
2. 高速離心機(jī):大轉(zhuǎn)速10000-30000 r/min之間;
有冷凍離心機(jī)和常溫離心機(jī)兩種,多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。
3. 超速離心機(jī):大轉(zhuǎn)速30000 r/min。
哪些微生物實(shí)驗(yàn)要用到離心機(jī)?
質(zhì)粒提取,蛋白表達(dá),菌體清洗及收集,原生質(zhì)體制備,微生物發(fā)酵前菌株的清洗,菌液洗滌,提取基因組或RNA提取 、DNA提取、酶活測(cè)定、濃縮菌體,提質(zhì)粒,休止細(xì)胞反應(yīng)等。總之,一切需要從液體中收集菌體的操作都需要用到離心機(jī),所以實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)常用的儀器設(shè)備。
離心微生物細(xì)胞需要多大的離心力RCF
比如:一般只是集菌的話5000rpm-6000rpm,5分鐘就夠了,10000rpm離心2min種即可收集到細(xì)菌菌體。
離心機(jī)轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力的換算公式為:RCF=11.18×(RPM/1000)2×R rpm。
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