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安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作

1. 目的：明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

2. 范圍：適用于安捷倫液相色譜儀。

3. 職責(zé)：檢驗(yàn)人員對此負(fù)責(zé)。

4. 操作規(guī)程：

4.1 系統(tǒng)組成
本系統(tǒng)由1個溶劑二元輸送泵（分主/A泵和副/B泵）、手動進(jìn)樣閥、柱溫箱、檢測器、化學(xué)工作站和電腦等組成。

4.2 安捷倫液相色譜儀準(zhǔn)備
4.2.1使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。
4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱（柱進(jìn)出口位置應(yīng)與流動相流向一致）和定量環(huán)。
4.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時配制），用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常
4.1 將待測樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC 所需流動相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等。

4.3安捷倫液相色譜儀開機(jī)：
4.3.1 打開計算機(jī),進(jìn)入中文Windows XP畫面,并運(yùn)行CAG Bootp Server程序。

4.3.2 打開 1200 LC 各模塊電源。
4.3.3 待各模塊自檢完成后，雙擊[Instrument 1 Online]圖標(biāo)，化學(xué)工作站自動與1200LC
通訊，進(jìn)入的工作站畫面如下所示。
4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運(yùn)行控制]畫面, 點(diǎn)擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄]， [ 顯示狀態(tài)工具欄]，[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖]，使其命令前有[√]標(biāo)志，來調(diào)用所需的界面。

4.3.5 把流動相放入溶劑瓶中。

4.3.6 打開沖洗閥。

4.3.7 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo)，點(diǎn)擊[設(shè)置泵…]選項，進(jìn)入泵編輯畫面。

4.3.8 設(shè)流速：5ml/min，點(diǎn)擊[確定]。
4.3.9 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo)，點(diǎn)擊[控制…]選項，選中[啟動]，點(diǎn)擊[確定] ，則系統(tǒng)開始沖洗，直到管線內(nèi)（由溶劑瓶到泵入口）無氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止。
4.3.10 點(diǎn)擊[泵] 圖標(biāo)，點(diǎn)擊[控制…]選項，選中[關(guān)閉]，點(diǎn)擊[確定]關(guān)泵， 關(guān)閉沖洗閥。
4.3.11 點(diǎn)擊[泵]圖標(biāo)，點(diǎn)擊 [設(shè)置泵…選項]，設(shè)流速：1.0ml/min。
4.3.12 點(diǎn)擊泵下面的瓶圖標(biāo)，如下圖所示（以單元泵為例），輸入溶劑的實(shí)際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積，點(diǎn)擊[確定]。

4.4 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集方法編輯
4.4.1開始編輯完整方法：從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項，如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項，點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫面。 4.4.2方法信息
4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息（如：測試方法）。 4.4.2.2 點(diǎn)擊 [確定]， 進(jìn)入下一畫面。 4.4.3 泵參數(shù)設(shè)定
4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min，在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓，以保護(hù)柱子。
4.4.3.2 點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫面。

4.4.4 柱溫箱參數(shù)設(shè)定
4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如：40度。并選中它,點(diǎn)擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側(cè)相同]，使柱溫箱的溫度左右一致。

4.4.4.2 點(diǎn)擊[確定]，進(jìn)入下一畫面。
4.4.5 檢測器參數(shù)設(shè)定：檢測波長：一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬：一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈。

4.4.6 在[ 運(yùn)行時選項表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集]，點(diǎn)擊[確定]。

4.4.7 點(diǎn)擊[方法]菜單，選中[方法另存為…]，輸入一方法名，如[測試]，點(diǎn)擊[確定]。
4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點(diǎn)擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點(diǎn)擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復(fù)10,選中[信號窗口2]。
單擊[改變]鍵，即可彈出右側(cè)的[編輯信號圖譜]窗口，進(jìn)而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運(yùn)行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項，如下圖所示，輸入操作者名稱，如[安裝工程師]；在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數(shù)器]。區(qū)別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴，在[計數(shù)器]框中輸入計數(shù)器的起始位，儀器會自動命名，如vwd數(shù)據(jù)0001，vwd數(shù)據(jù)0002……。
4.4.10 點(diǎn)擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開啟]。
4.4.11 等儀器準(zhǔn)備好，基線平穩(wěn)，用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。

4.5 安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)分析方法編輯:
4.5.1 從[視圖]菜單中，點(diǎn)擊[數(shù)據(jù)分析]進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫面。
4.5.2 從[文件]菜單選擇[調(diào)用信號]，選中您的數(shù)據(jù)文件名，如下圖所示。點(diǎn)擊[ 確定]，則數(shù)據(jù)被調(diào)出。
4.5.3做譜圖優(yōu)化：從[圖形]菜單中選擇[信號選項]，如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿量程] 或[自動量程] 及合適的時間范圍或選擇[自定義量程] 調(diào)整。反復(fù)進(jìn)行，直到圖的比例合適為止。點(diǎn)擊[ 確定]。

4.6安捷倫液相色譜儀積分:
4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項，如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度]
，[峰寬]，[zui小峰面積]，[zui小峰高]。