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在ELISA試劑盒供應(yīng)商實驗中如何確立正常值?

來源:上海谷研實業(yè)有限公司   2018年10月30日 10:59  

     ELISA試劑盒供應(yīng)商研究真核基因的基礎(chǔ)的工作之一就是確定其轉(zhuǎn)錄終止位點,目前通用的方法是5′-RACE法,RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman發(fā)明的、通過PCR快速克隆cDNA末端的技術(shù),它在不建立cDNA文庫的前提下,利用已知cDNA序列設(shè)計引物,通過往兩端延伸和擴增獲得其5′-端序列。本試劑盒就是根據(jù)5′-RACE原理而開發(fā),它具有下列特點:

1.    即開即用,客戶不需要單獨準(zhǔn)備各種材料。

2.    反應(yīng)條件經(jīng)過精心優(yōu)化,包括使用無RNase H活性的MMLV和優(yōu)化的引物。

      樣本正常的參考范圍,由于各個廠家的試劑及各個實驗室的做的結(jié)果都會有差異的,建議每個實驗室建立自己的參考范圍,正常標(biāo)本要經(jīng)過多個項目的驗證保證樣本是正常的,一般情況有2種方法來確定正常的參考范圍,一種是用95%的可信區(qū)間來確定,即:正常樣本的平均值±1.96SD(標(biāo)準(zhǔn)差),一種是99%可信區(qū)間來確定即:正常樣本的平均值±2.576SD(標(biāo)準(zhǔn)差).任何參考范圍都不是的,有部分個體的值高一點或者低一點都是有可能的,所以根據(jù)各自的需求,去建立各自的可信區(qū)間參考范圍。

 

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