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elisa定量檢測試劑盒受光照的影響

來源:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司   2017年11月02日 12:58  

elisa定量檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作中有很多步驟,每一步都很重要,今天就介紹一下elisa試劑盒顯色的重要性。
顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,有時(shí)可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺(tái)上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和SDS等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,elisa定量檢測試劑盒是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
美服培酮標(biāo)準(zhǔn)品    Mifepristone     200mg    84371-65-3 
美加明相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品        10mg    22321-23-9 
美侖孕酮醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品    Melengestrol Acetate     125mg    2919-66-6 
美侖孕酮醋酸酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品        25mg    
美侖孕酮醋酸酯相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品        25mg    
美羅培南標(biāo)準(zhǔn)品    Meropenem     300mg    119478-56-7 
美洛西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品    Mezlocillin Sodium     350mg    42057-22-7 
美洛昔康標(biāo)準(zhǔn)品    Meloxicam     400mg    71125-38-7 
美洛昔康相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品        25mg    24683-26-9 
美洛昔康相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品        25mg    7305-71-7 
美洛昔康相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品        30mg    118854-48-1 
美洛昔康相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品        30mg    
美沙比妥標(biāo)準(zhǔn)品    Metharbital CIII    200mg    1950/11/3
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