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ELISA試劑盒小珠一般為直徑0.6cm的圓球,外表經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。
聚苯乙烯為塑料,可制成各種方式,在測定進程中,它作為載體和容器,不參加化學(xué)反應(yīng),加之它的報價,所以被廣泛選用。
zui常用的載體為微量反應(yīng)板,于ELISA測定的產(chǎn)品也稱為ELISA板,用的標準板形是8×12的96孔式。
為便于作少量標本的檢查,有制成8聯(lián)或l2聯(lián)孔條的,放入座架后,巨細與標準ELISA板一樣。
聚苯乙烯載體的形狀首要有三種:小試管、小珠和微量反應(yīng)板。小試管的特征是還能兼作反應(yīng)的容器,終究放入分光光度計中比色。
作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特征為質(zhì)軟板薄,可切開,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。
ELISA板的特征是可以一起進行許多標本的檢查,并可在特定的比色計上活絡(luò)讀出效果。
如今已有多種自動化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢查,包括加樣、洗刷、保溫、比色等進程,對操作的標準化極為有利。
超卓的ELISA試劑盒板應(yīng)該是吸附功用好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間功用鄰近。
ELISA試劑盒免疫酶技術(shù)的首要試劑為固相的抗原或抗體、酶符號的抗原或抗體和與符號酶直接有關(guān)的酶反應(yīng)底物。
可作固相載體的物質(zhì)許多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的功用,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保存正本的免疫活性。
因而每一批號的聚苯乙烯制品在運用前須檢查其功用。
常用的檢查方法為:以必定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內(nèi)參加恰當(dāng)稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗刷,加底物顯色,間斷酶反應(yīng)后分別測每孔溶液的吸光度。
操控反應(yīng)條件,使各讀數(shù)在0.8支配。核算全部讀數(shù)的均勻值。
全部單個讀數(shù)與均勻讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯相似的塑料為聚氯乙烯。
在哪一種載體上陽性效果與陰性效果差異zui大,這種載體就是這一ELISA測定的zui合適的固相載體。
聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附功用比聚苯乙烯高,但空白值有時也略高。
為對比不一樣固相在某一ELISA測定中的好壞,可用以下方法加以查驗:用其他免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標本和一個典型的陰性標本。
ELISA試劑盒將它們分別進行一系列稀釋后,在不一樣的固相載體上按預(yù)定的ELISA操作進程進行測定,然后對比測定效果。
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