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Biotin標(biāo)簽蛋白檢測(cè)工具
親合素主要包括卵白親合素(Avidin,A)、鏈霉親合素(Streptavidin,SA)、卵黃親合素及類親合素等。后兩種因其特異性親合力低,研究不多,前兩種目前已深入研究并得到廣泛應(yīng)用。其中鏈霉親合素(SA)是與親合素(A)有類似生物學(xué)特性的一種蛋白質(zhì)。是由Streptomyces avidin菌在培養(yǎng)過(guò)程中分泌的一種蛋白質(zhì)產(chǎn)物,SA也可通過(guò)基因工程手段生產(chǎn)。SA分子量為65000,由4條序列相同的肽鏈構(gòu)成,每條SA肽鏈可以結(jié)合1個(gè)*分子。近年大量研究證實(shí),*—親合素系統(tǒng)幾乎可與目前研究成功的各種標(biāo)記物結(jié)合。在*-親和素系統(tǒng)中,借助所形成的親和素-*-酶復(fù)合物,追蹤*標(biāo)記的抗原或抗體,通過(guò)酶催化底物顯色,可檢出相應(yīng)的抗體或抗原。
產(chǎn)品名稱 | 應(yīng)用類型 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
HRP-Streptavidin | WB,IHC,ELISA | A21000 | 100ul/500ul |
使用HRP直標(biāo)鏈霉親和素產(chǎn)品,快速、特異性檢測(cè)*化蛋白質(zhì)
鏈霉親和素, HRP辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(SA-HRP)由鏈霉親和素(Streptavidin, SA)和辣根過(guò)氧化物酶(Horseradish Peroxidase)交聯(lián)所得,可用于*化的抗體、蛋白、組織、細(xì)胞、核酸等樣品的檢測(cè),常作為信號(hào)放大器,提高檢測(cè)靈敏度。
鏈霉親和素(SA)為4個(gè)相同亞基形成的四聚體蛋白質(zhì),分子量約為60 kDa,可以高度特異性地與*(Biotin)結(jié)合,1個(gè)SA可以結(jié)合4個(gè)*。與雞蛋清來(lái)源的親和素(Avidin)相比,SA無(wú)糖基化、等電點(diǎn)為中性或略酸性,因此SA的非特異性結(jié)合比Avidin低很多,用于檢測(cè)時(shí)非特異性背景就很低。
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)是一種含亞鐵血紅素的糖蛋白,分子量約為40 kDa,糖含量18%,顯棕色。能與底物孵育,產(chǎn)生一種著色、熒光或發(fā)光標(biāo)記的分子衍生物,這種現(xiàn)象使之廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域的檢測(cè)。
下表為常規(guī)用途的推薦稀釋比例,實(shí)際試驗(yàn)操作過(guò)程中可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況適當(dāng)調(diào)整HRP-SA的稀釋比例。以常規(guī)的Western bolt為例,每次檢測(cè)需要10 ml 1:2000的稀釋液,每次只需5 μl(5 μg)。
WB | ELISA | IHC/IC |
1:500 - 1:5000 | 1:200 - 1:500 | 1:200 - 1:500 |
WB:Western Blot; IHC:Immunohistochemistry; IC:Immunocytochemistry
注意事項(xiàng):
1)溶解后放置在冰浴上并盡量馬上使用;
2)若一次性用不完,請(qǐng)?jiān)谑褂们芭渲瞥赡敢翰⒎盅b成小規(guī)格(保證一次試驗(yàn)的用量)保存在-65℃,避免反復(fù)凍融影響蛋白活性
3)避免使用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化劑、高濃度的有機(jī)溶劑等易引起蛋白質(zhì)變性的試劑;
4)本產(chǎn)品于科研使用。
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