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GFP標(biāo)簽抗體使用指南

來源:武漢艾美捷科技   2017年04月27日 16:30  

 

GFP標(biāo)簽抗體,抗GFP綠色熒光單抗,GFP小鼠源單克隆抗體

 

Anti-GFP Tag Mouse Monoclonal Antibody (3D3)

 

背景資料:GFP(:Green:Fluorescent:Protein,綠色螢光蛋白)是由下村脩等人在1962年在一種學(xué)名Aequorea:victoria的水母中發(fā)現(xiàn)。其基因所產(chǎn)生的蛋白質(zhì),在藍(lán)色波長范圍的光線激發(fā)下,會(huì)發(fā)出綠色螢光。GFP標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞等,相應(yīng)的GFP標(biāo)簽抗體也被廣泛應(yīng)用。一般來說,GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w,也可以檢測和GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達(dá)蛋白等。

 

 

應(yīng)用類型:WB(1:1000-1:10,000)


Fig.1.IP (1:200) - WB (1:5,000) analysis of GFP fusion protein expression in 293 cells. Input: Hela cell lysate (lane A) and IP product (lane B).

Fig.2.WB (1:10,000) analysis of GFP fusion protein with Anti-GFP mouse monoclonal antibody (3D3) in 1:5,000 dilutions. 2ug GFP fusion protein (lane A) and 1 ug fusion protein (lane B).

 

免疫原:KLH偶聯(lián)的全長GFP熒光蛋白

 

來源宿主:小鼠

 

反應(yīng)性:該GFP標(biāo)簽抗體可識(shí)別天然或者變性的GFP,也可識(shí)別GFP變體如EGFP、YFP、EYFP和CFP等:

 

保存建議:在發(fā)貨后能在-20℃保存1年。為zui大限度的避免損失,請?jiān)诖蜷_管蓋之前融化抗體并離心。建議使用前分裝以避免反復(fù)凍融,分裝后可在4℃保存1個(gè)月。

 

如何選擇合適的GFP抗體?

 

在選擇一個(gè)標(biāo)簽抗體時(shí),主要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。這里需要考慮的因素包括,GFP抗體的應(yīng)用檢測類型、GFP抗體的克隆性及制備來源等。 比如 該GFP抗體是否能用于免疫熒光IF的檢測?是否可以用于Western Bloting和免疫沉淀IP實(shí)驗(yàn)?是否需要特異性更好的單克隆GFP標(biāo)簽抗體?一般來說,應(yīng)用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價(jià)都要優(yōu)于多克隆抗體。另外,抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面,也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。

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