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相信一些童鞋在拿到cck-8檢測試劑盒做cck-8細胞增殖檢測實驗,都會碰到一些實驗的問題,比如是1.在96 孔板中細胞鋪板總是不均勻 ,聚堆怎樣才能解決呢?2.在做加藥實驗時,藥物對測定是否有影響?如何解決?3.在實驗中吸光度值太高,如果不能減少細胞數(shù)量,如何解決?下面我們就為大家一一解答。
在做加藥實驗時,藥物對測定有時會有影響。如果藥物具有還原性,會和CCK8發(fā)生顯色反應,增加吸光度。解決辦法:首先要確認藥物是否有吸收,在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8,測定450 nm的吸光度,如果它的吸光度比不含藥物的培養(yǎng)基 (加CCK8)的吸光度高,則證明藥物有影響,可在加CCK8之前更換培養(yǎng)基,去掉藥物的影響。
在實驗中吸光度值太高,如果不能減少細胞數(shù)量,可以縮短加入CCK8后的培養(yǎng)時間。例如:可以把加入CCK8試劑后的培養(yǎng)時間由2小時縮短為1小時。
CCK-8檢測試劑盒作為為何是好的選擇對細胞增殖和毒性檢測
· 如下表,CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較,結(jié)果不言而喻!
檢測方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 | |||||
甲臜產(chǎn)物的水溶性 | 差(需加有機溶劑溶解后再檢測) | 好 | 好 | 好 | |||||
產(chǎn)品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 | |||||
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 即開即用 | 即開即用 | |||||
檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 | |||||
檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | zui短 | |||||
檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm | |||||
細胞毒性 | 高,細胞形態(tài)*消失 | 很低,細胞形態(tài)不變 | 很低,細胞形態(tài)不變 | 很低,細胞形態(tài)不變 | |||||
試劑穩(wěn)定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 | |||||
批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 | |||||
便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
* 細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到佳測定時間
* 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)
如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒?
目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的,國產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結(jié)果,在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于*供應CCK-8試劑盒的進口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品
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