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PCNA核內(nèi)參抗體WB實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參解決方案

來源:武漢艾美捷科技   2016年12月14日 17:00  

 增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系統(tǒng)性紅斑狼瘡)患者的血清中發(fā)現(xiàn)并命名,因其只存在于正常增殖細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞內(nèi)而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質(zhì),在細(xì)胞核內(nèi)合成,并存在于細(xì)胞核內(nèi),為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細(xì)胞核內(nèi)穩(wěn)定表達(dá),因此其抗體被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞核蛋白的內(nèi)參抗體。

如何選擇合適的細(xì)胞核內(nèi)參抗體?

常用的細(xì)胞總蛋白質(zhì)內(nèi)參有GAPDH和細(xì)胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。對于一些植物的樣本,則需要特別的植物Actin蛋白作為內(nèi)參。當(dāng)實(shí)驗(yàn)樣品中只是核蛋白,而不是細(xì)胞總蛋白提取液時(shí),可以用組蛋白H(Histone H),或者增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)等為核內(nèi)參抗體。除了這些,其它常見的核蛋白內(nèi)參還有K70, K80, Lamin A和B,在一些文獻(xiàn)報(bào)道中,Erk2、TATA binding protein(TBP)以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的問題是核蛋白內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的試驗(yàn)環(huán)境,比如在涉及細(xì)胞增殖相關(guān)試驗(yàn)中,c-Jun由于自身表達(dá)變化就不適合做內(nèi)參;而在凋亡實(shí)驗(yàn)時(shí),TBP、Lamin等也不適合作為內(nèi)參。

另外,我們還需要根據(jù)目的蛋白的大小選擇合適的核內(nèi)參,我們推薦內(nèi)參要與檢測的目的蛋白的分 子量相差5KD以上,因此你需要根據(jù)你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內(nèi)參。PCNA的檢測分子量大約在28kD,而Histone H3的檢測條帶大約在18kD,因此PCNA比較適合用于檢測目標(biāo)蛋白在較大的WB實(shí)驗(yàn),而Histone H3則不適合用于13kD-23kD大小的目的蛋白內(nèi)參。另外,雖然PCNA是zui合適的核內(nèi)參抗體之一,但是在某些條件下,一些影響增殖的因素會(huì)導(dǎo)致樣品間PCNA含量的變化,就不適合作為內(nèi)參。

一開始購買Abbkine的PCNA抗體是用來做WB的,效價(jià)挺高的。后來我們使用了組織塊作為樣品做共定位,我嘗試使用該抗體對PCNA做定位,做免疫組織化學(xué),WB和IHC效果都很不錯(cuò)。——中南民族大學(xué)生科院一客戶

 
產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7)AbbkineA01040詳情

 

另外,我們還需要考慮自己的需要,特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。一般來說,應(yīng)用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價(jià)都要優(yōu)于多克隆抗體。 另外,抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面,也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。一個(gè)效價(jià)高的100μl PCNA抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,zui終使用液相當(dāng)于500ml),要比效價(jià)低的1ml的PCNA抗體(假如WB檢測的稀釋比率是 1:200,zui終使用液相當(dāng)于2ml)性價(jià)比更高。因此在選擇抗體的時(shí)候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價(jià),即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的PCNA抗體?

供應(yīng)PCNA抗體的品牌是比較多的,象Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling、Sigma,甚至于Millipore、R&D、Novus、BD等都有相應(yīng)的產(chǎn)品。下面是幾個(gè)進(jìn)口品牌的簡單比較:

品牌貨號2013年報(bào)價(jià)規(guī)格應(yīng)用類型
ab29¥4418100µgWB, IP, IHC
2586S¥2997100μlWB, IF, IHC, FC
SAB2502099¥3299100μgWB, ELISA
A01040¥1800200μlWB, IHC

 

另外,一些國內(nèi)的供貨商也能提供分裝的PCNA抗體,但是在品牌和質(zhì)量保障上都有不足。國產(chǎn)分裝的PCNA抗體在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足,并且經(jīng)過分裝以后,其效價(jià)也有損失。而原產(chǎn)于國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室的PCNA抗體有些具有較好的檢測活性,但是在應(yīng)用類型上有差距,并且在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制,而國內(nèi)僅有的少量原產(chǎn)抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價(jià)比更高,同時(shí)也是*品牌的PCNA核內(nèi)參抗體,那Abbkine可能會(huì)是您的一個(gè)重要考慮選項(xiàng)之一。我們向您推薦Abbkine的PCNA核內(nèi)參抗體Anti-PCNA Monoclonal Antibody (1D7)(貨 號A01040)。

 
產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody (1D7)AbbkineA01040詳情

 

該抗體單克隆抗體,克隆號為1D7。其抗原為人PCNA蛋白中兼具特異性和保守的一段序列,可用于小鼠、人以及大鼠樣本的WB內(nèi)參。另外,該抗體的效價(jià)非常高,WB實(shí)驗(yàn)推薦稀釋比率為1:1000-1:10,000,甚至有客戶報(bào)告更高的稀釋比率。

幻燈顯示

 

點(diǎn)擊圖片查看Abbkine PCNA核內(nèi)參抗體更詳細(xì)信息

 

該P(yáng)CNA內(nèi)參抗體免疫組織化學(xué)的效果也很不錯(cuò),是一款非常適合做免疫組化對細(xì)胞骨架進(jìn)行染色定位的抗體產(chǎn)品。另外,也有客戶報(bào)告使用該抗體用于組織的熒光染色,也取得了意外的效果。

Abbkine還提供大包裝1ml以及更大規(guī)格定制的PCNA標(biāo)簽抗體,非常適合經(jīng)常進(jìn)行內(nèi)參驗(yàn)證或校準(zhǔn)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)需求。為方便客戶的使用, 上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國備有現(xiàn)貨。Abbkine針對中國市場,提供化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及保障,如果您在使用過程中有任何問題, 請直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰尽?/p>

 
產(chǎn)品名稱及描述品牌貨號產(chǎn)品說明
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美國Abbkine品牌是一家提供高性價(jià)比免疫學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國,作為其中國區(qū)域代理,將為客戶提供性 價(jià)比的常規(guī)免疫學(xué)試劑,如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家品牌的的中國代理或 區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,請致電免費(fèi)客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。

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