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第四儀器公司對分子發(fā)光分析法的講解

1. 熒光和磷光的產(chǎn)生：具有不飽和基團的基態(tài)分子受光照后，價電子躍遷產(chǎn)生熒光和磷光。

2. 激發(fā)光譜和發(fā)射光譜：

激發(fā)光譜：將激發(fā)光的光源用單色器分光，測定不同波長照射下所發(fā)射的熒光強度（F），以F做縱坐標，激發(fā)光波長λ做橫坐標作圖。激發(fā)光譜反映了激發(fā)光波長與熒光強度之間的關(guān)系。

發(fā)射光譜：固定激發(fā)光波長，讓物質(zhì)發(fā)射的熒光通過單色器，測定不同波長的熒光強度，以熒光強度F做縱坐標，熒光波長λ做橫坐標作圖。熒光光譜反映了發(fā)射的熒光波長與熒光強度的關(guān)系。

3. 熒光和分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系

發(fā)射熒光的物質(zhì)應(yīng)同時具備以下兩個條件：

物質(zhì)分子必須具有能夠吸收紫外或可見光的結(jié)構(gòu)，并且能產(chǎn)生π→π* 或 n→π* 躍遷。

熒光物質(zhì)必須有較大的熒光量子產(chǎn)率。

（1）躍遷類型：π→π*較n→π*躍遷的熒光效率高。

（2）共軛結(jié)構(gòu)：凡是能提高π電子共軛度的結(jié)構(gòu)，都會增大熒光強度，并使熒光光譜長移。

（3）剛性平面：分子的剛性及共平面性越大，熒光量子產(chǎn)率就越大。

（4）取代基效應(yīng)：在芳香化合物的芳香環(huán)上，給電子基團增強熒光，吸電子基團減弱熒光。

一、熒光分析法的特點

優(yōu)點：靈敏度高（提高激發(fā)光強度，可提高熒光強度），達ng/ml；選擇性強（比較容易排除其它物質(zhì)的干擾），重現(xiàn)性好；取樣少。

缺點：許多物質(zhì)本身不能發(fā)射熒光，因此，應(yīng)用不夠廣泛。

二、熒光分析法與UV-Vis法的比較

相同點：都需要吸收紫外-可見光，產(chǎn)生電子能級躍遷。

不同點：

熒光法測定的是物質(zhì)經(jīng)紫外-可見光照射后發(fā)射出的熒光的強度 (F);

UV-Vis法測定的是物質(zhì)對紫外-可見光的吸收程度 (A) ;

熒光法定量測定的靈敏度比UV-Vis法高。

三、名詞解釋：

單重態(tài)：當(dāng)基態(tài)分子的電子都配對時，S = 0，多重性 M=1，這樣的電子能態(tài)稱為單重態(tài)。

單重電子激發(fā)態(tài)：當(dāng)基態(tài)分子的成對電子吸收光能之后，被激發(fā)到某一激發(fā)態(tài)上。如果它的自旋方向不變，S=0，M=1，這時的激發(fā)態(tài)叫單重電子激發(fā)態(tài)。

三重態(tài)：若通過分子內(nèi)部的一些能量轉(zhuǎn)移，或能階間的跨越，成對電子中的一個電子自旋方向倒轉(zhuǎn)，使兩個電子自旋方向相同而不配對，這時S=1，M=3，這種電子激發(fā)態(tài)稱三重電子激發(fā)態(tài)（三重態(tài)）

系間跨越：指的是不同多重度狀態(tài)間的一種*躍遷過程。

振動弛豫：

內(nèi)轉(zhuǎn)換：指的是相同多重度等能態(tài)間的一種*躍遷過程。

量子產(chǎn)率：也稱熒光效率或量子效率，其值在0~1之間，它表示物質(zhì)發(fā)射熒光的能力。

熒光猝滅：指熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子相互作用引起熒光強度降低或熒光強度與濃度不呈線性關(guān)系的現(xiàn)象。

重原子效應(yīng)：