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       微重力三維細胞培育在國內似乎用的人不是許多,本文在此就簡單介紹一下該技術的原理，如果您對此有興趣，請與我們: 蘇州乾蕓儀器科技有限公司 電子:info@genintech.com !為使得本文理解更簡單，更貼近從事細胞培養(yǎng)工作人員實際所關心的問題，本文將就三維細胞培養(yǎng)技術以問答的形式進行展開、描述如下。

1. 旋轉式細胞培育體系(以下簡稱RCCS)生物反應器是怎么作業(yè)的？

       RCCS生物器是由中心的一個同軸氧合器以及一個水平旋轉培育皿所構成的。當培育皿充溢培育基而且旋轉時，培育基像固體一樣圍著水平軸旋轉。氧合器與容器壁以一樣的角速度旋轉。這些條件使得培育容器內發(fā)生層流和zui小的剪切力。細胞由離心力，重力和科式力效果而成懸浮狀況，因而在RCCS生物反應器的細胞遭到zui小的機械應力和高通量運送(營養(yǎng)物質，氧氣等)因而能集合構成類安排聚合物。氣體傳輸經過硅樹脂氧合器傳輸，然后避免氣泡的構成和湍流。

2. 當我經過平板培育得到好的成果時為啥我要換成3D細胞培育？

       二維細胞培育對咱們對細胞生物學的理解做出了很大的奉獻，可是能從中獲取的信息量仍是有約束性的?？茖W家盡管對過去100年的傳統(tǒng)細胞培育技能很滿意，可是這不再具有必要性。安排培育，依據(jù)界說，盡量仿照體內環(huán)境，而且很顯然，活著的生物日是三維的，而不是二維的。因而，為了樹立仿照體內生物學模型，體外培育體系必定成為三維的。

3. 與其他三維細胞培育體系比較，RCCS生物反應器的長處是啥？

       細胞嵌入盤或許多孔板的三維細胞外基質為zui近zui常用的三維細胞培育辦法。這個辦法盡管能夠發(fā)生相對不錯的3D安排模型，可是它又被有限的物質傳遞(這是因為培育的靜態(tài)特性，也因為基質關于物質傳輸是一個額定的屏障)和缺少可測量性所約束。 動態(tài)的培育體系，例如攪拌瓶，或許大規(guī)模的攪拌罐供應了非常好的物質傳遞，可是這些體系運用的機械應力，不只損壞細胞，而且還阻撓了它們的集合。 如前所述， RCCS生物反應器供應了非常好的質量傳遞和低機械應力答應了3D聚合物的構成。許多依據(jù)本生物反應器的研討顯現(xiàn)了其在3D細胞培育方面的優(yōu)勢。以下連接為成功運用RCCS生物反應器進行3D細胞培育的各種不一樣研討的文獻。

4. 細胞是不是在RCCS生物反應器的一個當?shù)囟毫簦?不，細胞和細胞集合體會在培育基中漂浮,這是生物反應器中觀察到的高物質傳輸?shù)闹匾蛩刂弧?/p>

5.怎么堅持微重力生物反應器里的溫度？ 生物反應器有必要放在恒溫箱里，恒溫箱的溫度能夠設定和維持在37℃。

6.我怎么保證培育所需氧氣？

       正如前面說到(疑問5)，生物反應器是放置在恒溫箱里的。依據(jù)培育所需,經過硅樹脂氧合器，恒溫箱中的空氣會分散入培育皿中。如果有較大的培育容器，有泵能夠使恒溫箱的空氣供應滿意培育所需。因為所有的氣體傳輸是經過分散完結，因而全過程不會發(fā)生氣泡和湍流。

7.培育容器應該以啥速度旋轉？

       這取決于細胞聚合體的直徑。當容器滾動時，細胞聚合體加快，直到他們抵達堆積速度，而該速度取決于細胞聚合體的巨細。依據(jù)斯托克斯方程，沉降速率跟著細胞聚合體半徑的平方而添加。因而，跟著聚合體體積上的添加，它們沉降的更敏捷，一起為了避免細胞聚合體與培育壁的磕碰有必要添加旋轉速度。因而，一開始可能以慢速旋轉培育，例如7rpm，當細胞聚合體在體積上添加而且變得可見，再添加旋轉的速度。

8.我能看到反應器中的氣泡嗎？

       蘇州乾蕓儀器科技認為RCCS生物反應器的首要意圖將使效果在細胞上的機械應力減到zui小。乃至很少的氣泡的存在將添加湍流和機械應力; 因而RCCS生物反應器是零頂部空間操作，而且氣體傳輸是經過分散完結以此來避免氣泡的構成?；蛟S跟著時刻的推移，因為細胞的呼吸會有小氣泡發(fā)生，去掉些小氣泡也是有很必要的(注射器能夠被用于有用的去掉氣泡)。

9. RCCS生物反應器有啥不一樣的運用？

       RCCS生物反應器的zui初意圖是仿照微重力。在運用這臺反應器用于地上試驗時期，咱們發(fā)現(xiàn)這些反應器中的細胞構成3D聚合體。從那以后，這些RCCS生物反應器被用于細胞和安排培育的幾個范疇。 RCCS生物反應器的運用范圍從根底細胞生物學到航天生物學，干細胞培育以及再生醫(yī)學和藥物開發(fā)，在將來，或許運用于疾病的和損害醫(yī)治。關于RCCS生物反應器的各式各樣運用的具體闡明，請點擊這兒（加上連接）。

10. 這是不是是轉瓶培育？

       轉瓶包括一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下，氣體運送是經過瓶頸。而且，轉瓶培育的意圖不是三維培育，而是二維培育。培育物沿著瓶壁成長，而且，當瓶滾動，培育物就會與媒介觸摸。因而，這兩個體系之間沒有相似性(拜見疑問1RCCS生物反應器的作業(yè)原理)。

11.當我想在微載體珠上培育細胞時，在我裝載它們進入反應器之前細胞是不是需求附在微珠？微珠和細胞能夠一起被裝載入反應器，但又獨立互相。在它們兩個被裝載入反應器以后在反應器里邊的細胞就會自動地附著微珠。

12.運用微重力生物反應器時需求一個恒溫箱嗎？

       是的，恒溫箱是為了堅持培育的溫度，pH值，氧氣供應量。應當留意水是從硅酮氧合器蒸騰到恒溫箱的。這個將致使培育皿中發(fā)生氣泡。所以，為了堅持水蒸氣的濃度，避免在培育容器中的蒸騰，恒溫箱里的濕度也是很重要的