Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型，不含酚紅)，英文名為Matrix-Gel™ Basement Membrane Matrix，即基底膜基質(zhì)，又稱ECM (Extracellular Matrix)或BME (Basement Membrane Extract)凝膠，不含乳糖脫氫酶增高病毒(Lactate dehydrogenase elevating virus, LDEV)?；|(zhì)膠廣泛用于血管生成、腫瘤細(xì)胞遷移、體內(nèi)腫瘤模型的建立、3D腫瘤細(xì)胞模型和類器官(Organoid)等研究領(lǐng)域。本產(chǎn)品與Corning^® Matrigel^®性能基本一致，甚至更優(yōu)，相應(yīng)產(chǎn)品可以替代。

Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型，不含酚紅)是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠腫瘤中提取的基底膜基質(zhì)，其主要成分為層粘連蛋白，還含有IV型膠原、硫酸肝素糖蛋白、巢蛋白、各種生長(zhǎng)因子、組織纖溶酶原激活物和微量的基質(zhì)金屬蛋白酶等。全系列產(chǎn)品均不含乳酸脫氫酶增高病毒或其它小鼠和腫瘤來(lái)源的病毒。在室溫條件下，基質(zhì)膠可快速聚合形成具有生物學(xué)活性的三維(3D)培養(yǎng)基質(zhì)，模擬體內(nèi)細(xì)胞基底膜的結(jié)構(gòu)、組成、物理特性和功能，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)元、黑色素瘤細(xì)胞、甲狀腺細(xì)胞及毛囊細(xì)胞等不同細(xì)胞的附著、維持、生長(zhǎng)與分化[1-6]，可用于對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生化功能、遷移、侵襲和基因表達(dá)等的研究。

Matrix-Gel™基質(zhì)膠系列產(chǎn)品有含/不含酚紅的標(biāo)準(zhǔn)型(Standard)、低生長(zhǎng)因子(Growth Factor Reduced, GFR)、高濃度(High Concentration, HC)、高濃度低生長(zhǎng)因子(HC, GFR)、干細(xì)胞用(hESC-Qualified)、類器官用(For Organoid Culture)等不同生長(zhǎng)因子、蛋白濃度含量、不同用途的多種類型的基質(zhì)膠。不含酚紅的Matrix-Gel™基質(zhì)膠適用于熒光檢測(cè)或顯色反應(yīng)等分析；低生長(zhǎng)因子的Matrix-Gel™基質(zhì)膠適用于對(duì)基質(zhì)成分要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞信號(hào)通路和細(xì)胞因子等的研究；高濃度的Matrix-Gel™基質(zhì)膠適用于研究血管生成、腫瘤細(xì)胞遷移和體內(nèi)腫瘤模型的建立等?？筛鶕?jù)實(shí)驗(yàn)需求并參考下表選擇合適的基質(zhì)膠產(chǎn)品。

本基質(zhì)膠的組成類似于保守的、早期發(fā)育的基底膜。本基質(zhì)膠主要成分由約60%的層粘連蛋白(Laminin)，約30%的IV型膠原蛋白(Collagen IV)和約8%的巢蛋白(Entactin)組成[7-8]，其中Entactin是一種橋接分子，它能夠與層粘連蛋白和IV型膠原蛋白相互作用，從而有助于細(xì)胞外基質(zhì)分子結(jié)構(gòu)組織的形成。除了主要成分外，基質(zhì)膠中還包含一些蛋白聚糖以及生長(zhǎng)因子，如硫酸肝素蛋白聚糖(Perlecan)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β (TGF-β)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、組織纖溶酶原激活物(PLAT)及腫瘤中自然存在的生長(zhǎng)因子，另外還有殘留的腫瘤細(xì)胞來(lái)源的基質(zhì)金屬蛋白酶等[9-10]。

本基質(zhì)膠在室溫條件下快速聚合。本基質(zhì)膠在10℃以上會(huì)開(kāi)始凝膠化，在22-37℃時(shí)，基質(zhì)膠大分子間可以通過(guò)化學(xué)鍵互相結(jié)合，促使基質(zhì)膠快速聚合形成3D凝膠基質(zhì)，而在一定范圍的低溫(如4℃)條件下由于沒(méi)有足夠的能量促使化學(xué)鍵結(jié)合，基質(zhì)膠呈現(xiàn)液體狀態(tài)。

本基質(zhì)膠可以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需要。基質(zhì)膠的蛋白質(zhì)濃度越高，粘稠度也越高。非高濃度基質(zhì)膠的蛋白濃度為8-13mg/ml，高濃度基質(zhì)膠的蛋白濃度為16-26mg/ml，基質(zhì)膠成膠濃度為3mg/ml，為避免成膠不完quan，用于體內(nèi)研究的基質(zhì)膠的終濃度不應(yīng)低于4mg/ml。

本基質(zhì)膠經(jīng)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，品質(zhì)高。每批次相關(guān)產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的蛋白濃度、內(nèi)毒素、凝膠、血管生成、腫瘤細(xì)胞3D培養(yǎng)、類器官培養(yǎng)、生物活性、無(wú)菌性(細(xì)菌、真菌、病毒、支原體)等檢測(cè)。

本系列基質(zhì)膠產(chǎn)品在各個(gè)應(yīng)用中的效果參見(jiàn)圖1-圖7。

圖1. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(高濃度,低生長(zhǎng)因子) (C0386/C0387)用于免疫缺陷小鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)的效果圖。選擇大小相近、生命體征相近的4-5周雄性裸鼠，分別接種HCT 116 (人結(jié)腸癌細(xì)胞)細(xì)胞懸液及1:1混合基質(zhì)膠(高濃度)的HCT 116細(xì)胞懸液，細(xì)胞數(shù)量為每只裸鼠80萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，經(jīng)過(guò)11天飼養(yǎng)后分離取出腫瘤。與僅注射HCT 116細(xì)胞懸液的對(duì)照組相比，混合基質(zhì)膠(高濃度)的HCT 116細(xì)胞懸液注射組小鼠的腫瘤體積明顯更大，成瘤速度更快，成瘤效果更好。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖2. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基質(zhì)膠(高濃度) (C0382/C0383)用于血管生成實(shí)驗(yàn)的效果圖。分別使用未經(jīng)稀釋的Matrix-Gel™基質(zhì)膠、Matrix-Gel™基質(zhì)膠和DMEM按照2:1 (即66.7%)、1:1 (即50%)混合的混合液，取50μl平鋪至96孔板中，待基質(zhì)膠凝固后，加入約3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞懸液，圖A為Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型)用于HUVEC (人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)的血管生成效果，圖B為Matrix-Gel™基質(zhì)膠(高濃度)用于RLSEC (大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞)的血管生成效果，培養(yǎng)時(shí)間為4小時(shí)，均可以觀察到顯著的管腔樣結(jié)構(gòu)。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖3. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型)(C0371/C0372)用于Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)的效果圖。將基質(zhì)膠1:8稀釋，平鋪在Transwell小室的上側(cè)，37℃凝膠2小時(shí)后，加培養(yǎng)液水化30分鐘，棄上清，在小室中加入約5萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/孔的HCT 116 (人結(jié)腸癌細(xì)胞)細(xì)胞懸液，并把Transwell小室下側(cè)浸沒(méi)在含血清培養(yǎng)液中，培養(yǎng)48小時(shí)后經(jīng)固定、結(jié)晶紫染色后的效果。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖4. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(低生長(zhǎng)因子) (C0375/C0376)用于小鼠膽管(Bile duct)、氣道上皮(Airway epithelium)類器官的培養(yǎng)效果圖。分離小鼠膽管和氣道上皮細(xì)胞，包埋于基質(zhì)膠后，接種于培養(yǎng)板上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，建立原代小鼠膽管和氣道上皮類器官。圖A為小鼠膽管類器官培養(yǎng)4天的形態(tài)圖，圖B為小鼠氣道上皮類器官培養(yǎng)4天的形態(tài)圖，培養(yǎng)狀態(tài)均良好。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖5. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(類器官用) (C0395/C0396)用于小鼠小腸(Small intestine)類器官的培養(yǎng)效果圖。分離小鼠小腸隱窩細(xì)胞，包埋于基質(zhì)膠后，接種于培養(yǎng)板上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，建立原代小鼠小腸類器官，并進(jìn)行傳代擴(kuò)增。連續(xù)7代(P1-P7)傳代后，類器官活力良好，增殖能力強(qiáng)，維持了明顯的隱窩樣結(jié)構(gòu)特征(圖A)和隱窩樣的分枝結(jié)構(gòu)(圖B)。實(shí)際效果會(huì)因組織種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖6. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型) (C0371/C0372)和Matrix-Gel™基質(zhì)膠(高濃度) (C0382/C0383)用于3D腫瘤球形成實(shí)驗(yàn)的效果圖。取狀態(tài)良好的HepG2 (人肝癌細(xì)胞)和SGC-7901 (人胃癌細(xì)胞)細(xì)胞，yi酶消化后獲得細(xì)胞懸液，分別與Matrix-Gel™基質(zhì)膠(標(biāo)準(zhǔn)型)和Matrix-Gel™基質(zhì)膠(高濃度)1:1混合后，滴加至96孔板中，待膠滴凝固后，添加含10% FBS的培養(yǎng)液，培養(yǎng)五天后，可以形成球體樣結(jié)構(gòu)。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

圖7. Matrix-Gel™基質(zhì)膠(干細(xì)胞用) (C0391/C0392)用于ES細(xì)胞(Embryonic stem cells, ES cells)的培養(yǎng)效果圖。使用Matrix-Gel™基質(zhì)膠(干細(xì)胞用)培養(yǎng)ES細(xì)胞1-8天，顯示Matrix-Gel™基質(zhì)膠(干細(xì)胞用)可以滿足ES細(xì)胞的培養(yǎng)需求，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好。實(shí)際效果會(huì)因細(xì)胞種類、實(shí)驗(yàn)條件的不同而存在差異，本圖僅供參考。

包裝清單：

保存條件：

-20℃或以下避光保存，兩年有效。初次解凍后請(qǐng)適當(dāng)分裝，避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：

本產(chǎn)品干冰運(yùn)輸，解凍前為固態(tài)。若到貨后泡沫盒中無(wú)干冰，且基質(zhì)膠呈凝膠狀而非液態(tài)化，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系碧云天。到貨后若不分裝或直接用于實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)立刻置于-20℃或以下溫度避光保存。

本基質(zhì)膠不可反復(fù)凍融。為保證基質(zhì)膠的使用效果，如有必要請(qǐng)收到本產(chǎn)品后按照單次用量分裝，盡可能減少凍融次數(shù)，或直接訂購(gòu)碧云天的1ml小包裝的本產(chǎn)品。

基質(zhì)膠須-20℃或以下避光保存，在保存過(guò)程中，本產(chǎn)品需維持在凍結(jié)狀態(tài)。由于無(wú)霜冰箱的自動(dòng)除霜功能可能影響冰箱內(nèi)的溫度，因此不建議將本產(chǎn)品儲(chǔ)存在無(wú)霜冰箱中。

本基質(zhì)膠的蛋白質(zhì)濃度具有批次差異性，一般都標(biāo)示在西林瓶的標(biāo)簽上，請(qǐng)根據(jù)標(biāo)示的蛋白濃度、所需蛋白濃度，確定基質(zhì)膠的用量以獲得一致性結(jié)果。具體稀釋濃度應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。

使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。解凍后，請(qǐng)將本產(chǎn)品放置在無(wú)菌的區(qū)域，在頂部噴灑70%乙醇消毒并風(fēng)干。

解凍的基質(zhì)膠避光放置于4℃冰箱或冰上可以保持30天左右的液態(tài)化，但仍建議解凍后就進(jìn)行分裝或用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

由于二氧化碳和碳酸氫鹽緩沖液以及酚紅(如有)的作用，本基質(zhì)膠在凍融的過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生顏色的變化。顏色的變化是正常現(xiàn)象，不影響產(chǎn)品使用效果。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中拿取基質(zhì)膠的時(shí)候需注意手不可接觸基質(zhì)膠部位的瓶身，避免體溫引起的基質(zhì)膠凝固，應(yīng)用手指持住裝有基質(zhì)膠的瓶子/管子上方。

實(shí)驗(yàn)完畢后，剩余的基質(zhì)膠不可留待下次使用。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。