細胞培養(yǎng)是人工模擬與創(chuàng)造細胞在體內的生存環(huán)境,由此可見培養(yǎng)基成為了細胞在體外正常生長與增值的重要角色,在細胞培養(yǎng)實驗中我們會遇到各種各樣的問題,一起來看一下基礎液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些吧?
問題一:液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣?
答:酚紅加量不同,導致顏色差異:DMEM >MEM > DMEM/F12 > RPMI1640>F12 & F10。
問題二:培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深?
答:空氣中CO2濃度低,培養(yǎng)基內CO2會逐漸溢出,HCO3-減少,造成培養(yǎng)基偏堿。
問題三:含有谷氨酰an培養(yǎng)基地保存條件?
答:谷氨酰an對溫度敏感,溫度越高降解速度越快。谷氨酰an在溶液中不穩(wěn)定,單獨保存應置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰an的液體培養(yǎng)基應存放在2°C–8°C,或者購買不含谷氨酰an的培養(yǎng)基使用時添加。
問題四:液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎?
答:不可以。在-20℃下,培養(yǎng)基中的鹽容易析出,培養(yǎng)基融化后,有些鹽無法重新溶解,從而導致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會產生過氧化氫,具有細胞毒性。
問題五:購買的液體培養(yǎng)基可以保存多久?
答:理論上只要保存得當,保質期范圍之內都可以用。但實際開瓶后保存時間過長會導致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變,因此建議開瓶后盡快用完。
問題六:更換培養(yǎng)基后細胞長不好?
(1)各廠家培養(yǎng)基配方不相同,可能細胞已經適應當前的培養(yǎng)體系;
(2)原代細胞更容易適應新的培養(yǎng)基,而傳代細胞系更換比較難;
(3)剛復蘇的細胞不要用來適應新培養(yǎng)基,細胞活率低,待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來馴化;
(4)敏感性細胞適應培養(yǎng)基,需要多馴化幾代,期間細胞死亡數(shù)量減少,生長緩慢是正?,F(xiàn)象。
問題七:DPBS和PBS有什么區(qū)別,能通用嗎?
答:都屬于磷酸鹽緩沖液,成分上只有一點點磷酸鹽的含量差異,均有等滲和調節(jié)pH的功能,大多數(shù)對于細胞的使用上可以通用。
問題八:HBSS 和PBS/DPBS有什么區(qū)別?
答:HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復雜,且含有葡萄糖,可為細胞提供簡單的營養(yǎng),而PBS/DPBS不能提供營養(yǎng)。
以上就是基礎液體培養(yǎng)基的常見問題解答,如果你想了解更多請咨詢百奧創(chuàng)新客服哦。
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