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U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-08-12 18:33:48瀏覽次數(shù):461次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*
英文名稱:U14-GFP(mouse uterine cervixcancer cell)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X1030
U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ELISA Kit for Ureidopropionase Beta (UPb1)    脲酰丙酸酶β(UPβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Uroplakin 1A (UPK1A)    尿溶蛋白1A(UPK1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Vomeronasal 1 Receptor 1 (VN1R1)    犁鼻1受體1(VN1R1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Xylosyltransferase II (XYLT2)    木糖基轉(zhuǎn)移酶Ⅱ(XYLT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Mediterranean Fever (MEFV)    家族性地中海熱基因(MEFV)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Mitofusin 1 (MFN1)    線粒體融合素1(MFN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Midline 1 (MID1)    Midline 1蛋白(MID1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST)    巰基丙酮酸硫轉(zhuǎn)移酶(MPST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Musculin (MSC)    肌蛋白(MSC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Metaxin 1 (MTX1)    Metaxin 1蛋白(MTX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Melanocortin 3 Receptor (MC3R)    黑素皮質(zhì)激素3受體(MC3R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Myotilin (MYOT)    肌收縮蛋白(MYOT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Myotubularin 1 (MTM1)    肌微管素1(MTM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neuron Navigator 1 (NAV1)    神經(jīng)元導(dǎo)向因子1(NAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neurochondrin (NCDN)    神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Ninein (NIN)    Ninein蛋白(NIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neuroligin 1 (NLGN1)    神經(jīng)連接蛋白1(NLGN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for N-Myristoyltransferase 2 (NMT2)    N-肉豆蔻?;D(zhuǎn)移酶2(NMT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Nucleolar Protein 1 ()    核仁蛋白1()檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neuroplastin (NPTN)    神經(jīng)絲束蛋白(NPTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
U14-GFP(小鼠子宮細(xì)胞)*ELISA Kit for Neurexin 1 (NRXN1)    軸突蛋白1(NRXN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neurofibromin 1 (NF1)    神經(jīng)纖維素1(NF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)    進(jìn)口、國產(chǎn)    規(guī)格:    48T/96T
ELISA Kit for Neurotensin Receptor 2 (SR2)    神經(jīng)降壓素受體2

 

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