產(chǎn)品名稱(chēng)：RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)*
英文名稱(chēng)：RAW 264.7(leukemia cellsin mouse macrophage)
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0748
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)*的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)*培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit  人抗著絲點(diǎn)抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MYOG(Human myogenin) ELISA Kit  人肌細(xì)胞生成素    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit  人A組鏈球菌菌壁多糖抗體    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit  人活化蛋白C抵抗素    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit  人N端外顯肽    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SC(Human secretory component) ELISA Kit  人分泌成分    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit  人二磷酸腺苷    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit  人蛋白聚糖    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit  人吡啶酚    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit  人5羥基吲哚乙酸    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit  人12羥二十烷四烯酸    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit  人羥*    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
NO(Human nitric oxide) ELISA Kit  人一氧化氮    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit  人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VC(Human Vitamin C) ELISA Kit  人*    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit  人*6    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit  人可溶性P選擇素    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD(Human Vitamin D) ELISA Kit  人*    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit  人*1    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit  人*12    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit  人*3    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD2(Human Vitamin D2) ELISA Kit  人*2    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)*VE(Human Vitamin E) EELISA Kit  人*    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VA(Human Vitamin A) ELISA Kit  人*    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GEF(Human Guanine Exchange Factor) ELISA Kit  人鳥(niǎo)苷酸交換因子    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit  人*受體    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T