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所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-08 14:52:46瀏覽次數(shù):158次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基操作方法
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基運輸
英文名稱:Mediumratintestinal smooth muscle cells
規(guī)格:100mL
產(chǎn)品貨號:FS-X0340
大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基運輸收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
Bilirubin 規(guī)格: 20mg/支
大葉茜草素 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: 規(guī)格: 20mg/支
*皂苷A 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: 規(guī)格: 20mg/支
羥基*A 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: Hydroxysafflor yellow A 規(guī)格: 20mg/支
琥珀酸 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: 規(guī)格: 20mg/支
槐角堿 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: 規(guī)格: 20mg/支
胡蘆巴堿 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: 規(guī)格: 20mg/支
* 進口/國產(chǎn) 英文名稱 祖師麻甲素 含量: Daphnetin 規(guī)格: 20mg/支
小白菊內(nèi)酯 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: Parthenolide 規(guī)格: 20mg/支
重樓皂苷I 進口/國產(chǎn) 英文名稱 重樓皂甙I 含量: Polyphyllin I 規(guī)格: 20mg/支
重樓皂苷II 進口/國產(chǎn) 英文名稱 重樓皂甙II 含量: Polyphyllin II 規(guī)格: 20mg/支
鼠尾草酚 進口/國產(chǎn) 英文名稱 鼠尾草苦內(nèi)脂 含量: Carnosol 規(guī)格: 20mg/支
重樓皂苷VI 進口/國產(chǎn) 英文名稱 重樓皂甙VI 含量: Polyphyllin VI 規(guī)格: 20mg/支
大鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基運輸重樓皂苷VII 進口/國產(chǎn) 英文名稱 重樓皂苷VII 含量: Polyphyllin VII 規(guī)格: 20mg/支
烏金苷 進口/國產(chǎn) 英文名稱 烏金甙 含量: 規(guī)格: 20mg/支
獐牙菜苷 進口/國產(chǎn) 英文名稱 獐牙菜苷; 當(dāng)藥苷 含量: Sweroside 規(guī)格: 20mg/支
豆腐果苷 進口/國產(chǎn) 英文名稱 豆腐果甙;* 含量: Helicid 規(guī)格: 20mg/支
* 進口/國產(chǎn) 英文名稱 含量: (?)-Huperzine A 規(guī)格: 20mg/支
川陳皮素 進口/國產(chǎn) 英文名稱 川皮亭;蜜橘黃素 含量: Nobiletin 規(guī)格: 20mg/支
告達亭苷元 進口/國產(chǎn) 英文名稱 告達亭甙元 含量: 規(guī)格: 20mg/支
青陽參苷元A 進口/國產(chǎn) 英文名稱 青陽參甙元A 含量: Qingyangshengenin A 規(guī)格: 20mg/支
青陽參苷元B 進口/國產(chǎn) 英文名稱 青陽參甙元B 含量: Qingyangshengenin B 規(guī)格: 20mg/支
補骨脂酚 進口/國產(chǎn) 英文名稱 此產(chǎn)品為液體 含量: Bakuchiol 規(guī)格: 20mg/支
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