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更新時(shí)間:2017-08-07 14:27:25瀏覽次數(shù):113次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基保存運(yùn)輸
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小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:QBC-939 人膽管癌細(xì)胞運(yùn)輸
英文名稱:QBC-939 human cholangiocarcinoma cell
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0112
QBC-939 人膽管癌細(xì)胞運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
QBC-939 人膽管癌細(xì)胞運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
白鮮堿 英文名稱: Dictamnine : 484-29-7 分子式: C12H9NO2 199.21 10mg
百秋李醇(氣相97%) 英文名稱: Patchouli alcohol : 5986-55-0 分子式: C15H26O 222.37 20mg
白屈菜紅堿 英文名稱: Chelerythrine : 34316-15-9 分子式: C21H18NO4+ 348.37192 20mg
鹽酸白屈菜紅堿 英文名稱: Chelerythrine chloride : 3895-92-9 分子式: C21H18ClNO4 383.82 20mg
白蠟樹素 英文名稱: Dimethylfraxetin : 6035-49-0 分子式: C12H12O5 236.22 10mg
百蕊草素I 英文名稱: Kaempeerol-3-O-glucorhamnoside : 40437-72-7 分子式: C27H30O15 594.52 20mg
表木栓醇 英文名稱: Friedelan-3beta-ol : 16844-71-6 分子式: C30H52O 428.73 10mg
扁蓄苷 英文名稱: avicularin : 572-30-5 分子式: C20H18O11 434.35 20mg
貝萼皂苷元 英文名稱: Bayogenin : 6989-24-8 分子式: C30H48O5 488.7 20mg
別隱品堿 英文名稱: Allocryptopine : 485-91-6 分子式: C21H23NO5 369.41 20mg
巴西蘇木素 英文名稱: "Brazilin
" : 474-07-7 分子式: C16H14O5 286.28 10mg
蘇木素 英文名稱: Hematoxylin : 517-28-2 分子式: C16H14O6 302.28 20mg
原蘇木素B 英文名稱: Protosappanin B : 102036-29-3 分子式: C16H16O6 304.09 10mg
檳榔堿 英文名稱: Arecoline hydrobromide : 300-08-3 分子式: C8H14BrNO2 236.11 20mg
小檗堿 英文名稱: Berberine : 2086-83-1 分子式: C20H18NO4 336.37 20mg
* 英文名稱: Berberine hydrochloride : 633-65-8 分子式: C20H18ClNO4 371.81 20mg
表小檗堿 英文名稱: Epiberberine : 6873/9/2 分子式: C20H18NO4 336.36 20mg
二氫小檗堿 英文名稱: Canadine : 522-97-4 分子式: C28H58O 410.76 20mg
四氫小檗堿 英文名稱: Tetrahydroberberine : 522-97-4 分子式: C20H21NO4 339.39 20mg
黃連堿 英文名稱: Coptisine : 3486-66-6 分子式: C19H14NO4 320.32 20mg
鹽酸黃連堿 英文名稱: Coptisine chloride : 6020-18-4 分子式: C19H14ClNO4 355.77 20mg
甲基黃連堿 英文名稱: Worenine chloride : 分子式: C20H16ClNO4 838.64 20mg
QBC-939 人膽管癌細(xì)胞運(yùn)輸α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱: α-spinasteryl-3-O-β-D-glucoside : 分子式: 5mg
扁塑藤素 英文名稱: Pristimerin : 1258-84-0 分子式: C30H40O4 464.642 20mg
* 英文名稱: Paclitaxel : 33069-62-4
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