產(chǎn)品名稱：Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存
英文名稱：Hepa1-6mouse hepatoma cell line
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號：FS-X0111
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉?/a>。
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

分子式：    C47H51NO14    853.91    20mg
三尖杉寧堿    英文名稱：    Cephalomannine    :    71610-00-9    分子式：    C45H53NO14    831.9    20mg
10－脫乙酰基巴卡丁III    英文名稱：    10-Deacetylbaccatin III    :    32981-86-5    分子式：    C29H36O10    544.59    20mg
多烯*    英文名稱：    Docetaxel    :    114977-28-5    分子式：    C43H53NO14    807.88    20mg
7-表*    英文名稱：    7-Epitaxol    :    105454-04-4    分子式：    C47H51NO14    853.913    20mg
7-表-10-去乙?；?（95%）    英文名稱：    Deacetyltaxol；10-Deacetyltaxol    :    78432-77-6    分子式：    C45H49NO13    811.87    20mg
D(+)-半乳糖    英文名稱：    D-Galactose    :    59-23-4    分子式：    C6H12O6    180.16    20mg
*    英文名稱：    D(+)-Glucose    :    50-99-7    分子式：    C6H12O6    180.16    100mg
棉籽糖    英文名稱：    D(+)-Raffinose pentahydrate    :    17629-30-0    分子式：     C18H42O21    594.51    20mg
3,6’-二芥子?；崽牵?0%）    英文名稱：    3,′6-d isinapoyl sucrose    :        分子式：    C36H46O17    "754 
"    20mg
蔗糖    英文名稱：    Sucrose    :    57-50-1    分子式：    C12H22O11    342.3    100mg
耐斯糖    英文名稱：    Nystose     :    13133-07-8    分子式：    C24H42O21    666.58    20mg
苦杏仁苷    英文名稱：    Amygdalin    :    29883-15-6    分子式：    C20H27    457.43    20mg
扁桃酸    英文名稱：    Mandelic acid    :    611-71-2    分子式：    C8H8O3    152.15    20mg
長春新堿    英文名稱：    Vincristine    :    57-22-7    分子式：    C46H56N4O10    824.96    20mg
長春花堿    英文名稱：    Vinblastine    :    865-21-4    分子式：    C46H58N4O9    810.97    20mg
長春質(zhì)堿    英文名稱：    Catharanthine    :    2468-21-5    分子式：    C21H24N2O2    336.43    20mg
文多靈    英文名稱：    Vindoline    :    2182-14-1    分子式：    C25H32N2O6    456.53    20mg
長春瑞濱    英文名稱：    VINORELBINE    :    71486-22-1    分子式：    "C45H54N4O8
"    778.94    20mg
長春胺    英文名稱：    Vincamine    :    "1617-90-9
"    分子式：    "C21H26N2O3
"    354.44    20mg
*    英文名稱：    Vinpocetine    :    42971-09-5    分子式：    C22H26N2O2    350.46    20mg
川續(xù)斷皂苷乙    英文名稱：    Dipsacoside B    :    33289-85-9    分子式：    C53H86O22    1075.24    20mg
Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞保存川續(xù)斷皂苷Ⅵ    英文名稱：    Akebia saponin D    :    39524-08-8    分子式：    C47H76O18     929.099    20mg
*    英文名稱：    Hesperidin    :    520-26-3    分子式：    C28H34O15    610.56    20mg
橙皮素    英文名稱：    "Hesperetin
"    :    520-33-2    分子式：    C16H14O6    302.28    20mg
橘皮素    英文名稱：    Tangeretin    :    481-53-8    分子式：    C20H20O7    372.37    20mg
甲基*（95%）    英文名稱：    Methyl hesperidin    :    11013-97-1    分子式：    C29H36O15    624.59