產(chǎn)品名稱：HuH-7人肝癌細(xì)胞運(yùn)輸
英文名稱：HuH-7 human hepatocellular carcinoma cells
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0101
HuH-7人肝癌細(xì)胞運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
HuH-7人肝癌細(xì)胞運(yùn)輸收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

-3    分子式：    C42H62O16    822.93    20mg
*鹽    英文名稱：    Glycyrrhizic acid ammonium salt    :    53956-04-0    分子式：    C42H65NO16    839.96    20mg
*    英文名稱：    Diammonium glycyrrhizinate    :    79165-06-3    分子式：    C42H62O16.2H3N    856.997    20mg
甘草苷    英文名稱：    Liquiritin    :    551-15-5    分子式：    C21H22O9    418.396    20mg
異甘草苷    英文名稱：     Isoliquiritin    :     5041-81-6    分子式：     C21H22O9    418.39     20mg
甘草次酸    英文名稱：    18 β-Glycyrrhetintic Acid    :    471-53-4    分子式：    C30H46O4    470.68    20mg
光甘草定    英文名稱：    Glabridin    :    59870-68-7    分子式：    C20H20O4    324.37    20mg
甘草查爾酮A    英文名稱：    Licochalcone A    :    58749-22-7    分子式：    C21H22O4    338.4    20mg
甘草查爾酮B    英文名稱：    Licochalcone B    :    58749-23-8    分子式：    C16H14O5        20mg
甘草查爾酮C    英文名稱：    Licochalcone C    :    144506-14-9    分子式：    C21H22O4        20mg
甘草素    英文名稱：    Liquiritigenin    :    578-86-9    分子式：    C15H12O4    256.25    20mg
異甘草素    英文名稱：    Isoliquiritigenin    :    961-29-5    分子式：    C15H12O4    256.25    20mg
水甘草堿    英文名稱：    Tabersonine    :    4429-63-4    分子式：    C21H24N2O2    336.43    20mg
*    英文名稱：    Podophyllotoxin    :    518-28-5    分子式：    C22H22O8    414.41    20mg
*-4-O-葡萄糖苷    英文名稱：    Podophyllotoxin-4-O-glucoside     :    16481-54-2    分子式：    C28H32O13        10mg
4'-去甲基表*    英文名稱：    4'-Demethylepipodophyllotoxin    :    6559-91-7     分子式：    C21H20O8    400.38    20mg
*    英文名稱：    Puerarin    :    3681-99-0    分子式：    C21H20O10    432.38    20mg
3'-甲氧基*    英文名稱：    3’- Methoxy Puerarin    :    117047-07-1    分子式：            20mg
4'-O-甲基*    英文名稱：    "4'-O-Methylpuerarin
"    :    "92117-94-7
"    分子式：    C22H22O9    430.41    10mg
3'-羥基*    英文名稱：    3'-hydroxy Puerarin    :    117076-54-5    分子式：            20mg
鉤吻堿    英文名稱：    Gelsemine    :    509-15-9    分子式：    C20H22N2O2    322.4    20mg
鉤吻素子    英文名稱：    koumine    :    1358-76-5    分子式：    C20H22N2O2    306.407    20mg
高良姜素    英文名稱：    3,5,7-Trihydroxyflavone    :    548-83-4?    分子式：    C15H10O5    270.24    20mg
HuH-7人肝癌細(xì)胞運(yùn)輸三尖杉?jí)A    英文名稱：    Cephalotaxlen    :    24316-19-6    分子式：    C18H21NO4    315.36    20mg
*    英文名稱：    Homoharringtonine    :    26833-87-4    分子式：    C29H39NO9    545.62    20mg
鉤藤堿    英文名稱：     Rhynchophylline    :    76-66-4    分子式：    C22H28N2O4    384.47    20mg
去氫鉤藤堿    英文名稱：    Corynoxeine    :    630-94-4    分子式：    C22H26N2O4         20mg