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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-08-07 14:20:10瀏覽次數(shù):154次
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小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
產(chǎn)品名稱:U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞上海直銷
英文名稱:U251 human glioma cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0099
U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞上海直銷的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞上海直銷收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
18-5 分子式: C30H50O5 490.71 20mg
黃芪皂苷III 英文名稱: Astragaloside Ⅲ : 84687-42-3 分子式: C41H68O14 784.974 10mg
黃芪皂苷II 英文名稱: AstragalosideⅡ : 84676-89-1 分子式: C41H66O15 798.95 10mg
黃芪皂苷I 英文名稱: AstragalosideⅠ : 84680-75-1 分子式: C43H68O16 840.99 10mg
乙酰黃芪皂苷I 英文名稱: Acetytastragaloside : 分子式: 10mg
紫云英苷 英文名稱: Astragalin : 480-10-4 分子式: C21H20O11 448.38 20mg
灰氈毛忍冬皂苷乙 英文名稱: Macranthoidin B : 136849-88-2 分子式: C65H106032 1399.53 20mg
* 英文名稱: Palmatine : 3486-67-7 分子式: C21H22NO4+ 352.4 20mg
* 英文名稱: Baicalin : 21967-41-9 分子式: C21H18O11 446.36 20mg
黃芩素 英文名稱: Baicalein : 491-67-8 分子式: C15H10O5 270.24 20mg
漢* 英文名稱: Wogonoside : 51059-44-0 分子式: C6H10O7 194.1394 20mg
漢黃芩素 英文名稱: Wogonin : 632-85-9 分子式: C16H12O5 284.26 20mg
哈巴俄苷 英文名稱: Harpagoside : 19210-12-9 分子式: C24H30O11 494.49 20mg
哈巴苷 英文名稱: Harpagide : 6926/8/5 分子式: C15H24O10 364.35 20mg
乙酰哈巴苷 英文名稱: 8-O-Acetylharpagide : 6926-14-3 分子式: C17H26O11 406.38 20mg
黃柏堿 英文名稱: Phellodendrine : 6873-13-8 分子式: C20H24NO4 342.413 20mg
鹽酸黃柏堿 英文名稱: Phellodendrine chloride : 104112-82-5 分子式: C20H24NO4.Cl 377.866 20mg
黃柏酮 英文名稱: Obacunone : 751-03-1 分子式: C26H30O7 454.516 20mg
黃楊堿 英文名稱: Cyclovirobuxine : 860-79-7 分子式: C26H46N2O 402.66 20mg
亥茅酚苷 英文名稱: Sec-O-Glucosylhamaudol : 80681-44-3 分子式: C21H26O10 438.426 20mg
* 英文名稱: Allomatrine : 641-39-4 分子式: C15H24N2O 248.36 20mg
U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞上海直銷槐果堿 英文名稱: Sophocarpine : 145572-44-7 分子式: C15H22N2O 246.35 20mg
氧化槐果堿 英文名稱: Oxysophocarpine : 26904-64-3 分子式: C15H22N2O2 262.351 20mg
槐角苷 英文名稱: Sophoricoside : 152-95-4 分子式: C21H20O10 432.38 20mg
海柯皂苷元(95%) 英文名稱: Hecogenin : 467-55-0 分子式: C27H42O4 430.62 20mg
環(huán)氧澤瀉烯 英文名稱: Alismoxide : 87701-68-6 分子式: C15H26O2 238.37 20mg
絡(luò)塞琳 英文名稱: Rosarin : 84954-93-8 分子式: C20H28O10 428.43 10mg
絡(luò)緦 英文名稱: Rosin : 85026-55-7 分子式:
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