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133次elisa定量檢測試劑盒實驗的幾個基本步驟:
1.加樣
◎加樣應(yīng)用微量移液器(加樣槍)按規(guī)定的量加入微孔板的1/3處避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
◎每次加樣應(yīng)更換吸嘴,做到一人一吸頭,以免發(fā)生交叉污染;干吸頭預(yù)先在血清中抽吸三次。
◎樣本稀釋,目的是為了減少非特異性反應(yīng),所以一定要先加稀釋液后加樣本,特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘,同時注 意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時均需振蕩混勻。
◎如用滴瓶滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去*滴有氣泡的試劑后加樣。
2.溫育
◎抗原抗體反應(yīng)需要在一定溫度下(37°C),經(jīng)過一定的時間才能達到反應(yīng)的平衡點
◎ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能 使反應(yīng)液溫度迅速達到平衡的水浴法。一種放在水浴箱的隔板上,另一種是放在溫箱的濕盒里。水要浸至板條的1/3處,不可將板條疊 加放置。
◎邊緣效應(yīng)(2ng/mlHBsAg一步法三種不同溫育法的結(jié)果)
洗滌
◎ELISA是靠洗滌來達到分離結(jié)合與未結(jié)合抗原抗體復(fù)合物及酶標(biāo)記物的目的,同時洗滌也可將非特異吸附的蛋白質(zhì)的干擾以及血球 、細(xì)菌中的酶干擾清除掉。
◎手工洗滌一般采用浸泡方法:1)甩去孔內(nèi)反應(yīng)液;
2)用洗滌液過洗一遍(即注滿孔后即甩去);
3)微孔重新注滿洗液后浸泡2-3分鐘,間歇搖動;
4)甩去孔內(nèi)液體,拍板,用紙吸干。
重復(fù)以上操作至少5次。注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。
◎洗板機洗板一定要預(yù)先把板架放平,使洗板機上的每個放液和吸液纖孔都能一致地插入孔底,將孔內(nèi)液體全部吸干,同時要設(shè)置一定的 浸泡時間。如出現(xiàn)機洗后拍板有較多殘留液時應(yīng)再用手工洗2次以上。關(guān)機前要用蒸溜水沖洗管道,避免堵孔。
3.顯色
◎HRP催化底物的一步呈色反應(yīng),同樣需要一定的時間和溫度,
◎ 一定要按照說明書規(guī)定的時間溫度(一般為37°C,10-15分鐘)恒定反應(yīng)后終止,
◎或根據(jù)臨界值質(zhì)控血清吸光度值達0.2左右使的時間而恒定反應(yīng)時間。
4.酶標(biāo)儀判讀結(jié)果
◎顯色反應(yīng)終止后應(yīng)立刻比色(30分鐘內(nèi))。
elisa定量檢測試劑盒γ谷氨酰半*合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒 ,英文名: γ-ECS ELISA Kit
γ*-半*合成酶(γ-GCS)ELISA試劑盒 ,英文名: γ-GCS ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 ,英文名: IFI16/p16 ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 ,英文名: MIGF/CXCL9 ELISA Kit
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γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFN-γ ELISA Kit
γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒 ,英文名: IFNγ ELISA Kit
γ分泌素激活蛋白(PION)ELISA試劑盒 ,英文名: PION ELISA Kit
γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒 ,英文名: GABA ELISA Kit
β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)ELISA試劑盒 ,英文名: BTRC ELISA Kit
β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒 ,英文名: ARRB2 ELISA Kit
β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 ,英文名: β-TG ELISA Kit
β血小板球蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 ,英文名: β-TG ELISA Kit
β細(xì)胞素(BTC)ELISA試劑盒 ,英文名: BTC ELISA Kit
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒 ,英文名: BACE2 ELISA Kit
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA試劑盒 ,英文名: BACE1 ELISA Kit
β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒 ,英文名: MSMB/PRSP ELISA Kit
β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒 ,英文名: TUBB ELISA Kit
β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒 ,英文名: β-Lg ELISA Kit
β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒 ,英文名: β-OHB ELISA Kit
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 ,英文名: βGD ELISA Kit
β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 ,英文名: β-glucosidase ELISA Kit
β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 ,英文名: β-glucosidase ELISA Kit
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