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更新時間:2017-09-08 10:53:59瀏覽次數(shù):125次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中,1個月內出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
細胞名稱 人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達載體pCMV.3中,轉染結腸癌細胞RKO,建立了RKO-AS45-1細胞株。 該細胞含有穩(wěn)定整合巨細胞病毒(CMV)啟動子的表達載體。 RKO-AS45-1細胞系和它的母系RKO一起可用于Gadd45對DNA修復、凋亡和藥物敏感性研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
FAM171B Others Human 人 FAM171B / KIAA1946 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H021人前列腺平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
主動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
293001A細胞,Sars蛋白表達株 人癌細胞,MDA-MB-436細胞 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM-prf
白牦牛皮膚細胞;Yak-2
IL35 Others Human 人 IL-35 (IL12A & IL27B) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;HFL-I
人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7
GLYCOPROTEIN Others Sudan ebolavirus 蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 人細胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 貓腎細胞,CRFK細胞 Cyc-Tag(S49)細胞,小鼠T淋巴細胞瘤細胞
骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CRP Others Mouse 小鼠 CRP / PTX1 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9
TMED1 Others Human 人 TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腸微血管內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
AMS2細胞,人干細胞因子單克隆抗體細胞株 阪崎腸桿菌 大耳山羊皮膚細胞;LDG-3
IL8 Protein Canine 重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白
OP9(小鼠骨髓基質細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照)
溶液0.4ml/支*20支用于空腸彎曲菌馬尿酸水解試驗
三糖鐵(TSI)瓊脂 Triple Sugar Iron Agar 生化培養(yǎng)基,用于腸桿菌科細菌的生化反應篩選(GB2008標準)
UVM培養(yǎng)基 UVM Medium 250 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MERCK標準)
嗜鹽菌選擇性瓊脂250g/瓶含4%NaCl,用于副溶血性弧菌的純化incubationmedia嗜鹽菌選擇性瓊脂250g/瓶含4%NaCl,用于副溶血性弧菌的純化
四硫磺酸鹽煌綠增菌液(TTB肉湯) 10ml*20支/包 用于沙門氏菌選擇
WagstsumaAgarBase
BM固體培養(yǎng)基 250g 用于醋酸鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
O/F培養(yǎng)基(HLGB) O/F Medium 250 用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型(發(fā)酵型或氧化型)(SN標準)
CVT瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于乳及乳制品中嗜低溫細菌總數(shù)的測定incubationmediaCVT瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于乳及乳制品中嗜低溫細菌總數(shù)的測定
VTMBroth
人結腸癌轉基因細胞;RKO-AS45-1圖片沙門氏志賀氏增菌液250g用于志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養(yǎng)
Nitrogen-fixingRhizobiummedium
產毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的產毒培養(yǎng)
TGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)incubationmediaTGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無菌檢驗(日本)
MFCAgar
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