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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-09-08 10:24:26瀏覽次數(shù):123次
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細(xì)胞名稱(chēng) 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的;該患者曾使用過(guò)*、*、*進(jìn)行治療。該細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;可作轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化20分鐘。1:2。5-6天長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 P(19+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),進(jìn)口來(lái)源,保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
IL23 Others Mouse 小鼠 IL-23 / IL23A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0432RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞RNAHIMEC miRNA5 μg
RBE細(xì)胞,人膽管癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞,ECA細(xì)胞 人羊膜上皮細(xì)胞
M14(人黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK.f pooled Pellet 正常人表皮角質(zhì)細(xì)胞團(tuán)塊(少年者,混合來(lái)源) > 1 mio.cells 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECM
人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24
FAS Others Cynomolgus 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79 卵巢癌細(xì)胞,SK-OV-3細(xì)胞 WCF細(xì)胞,團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
卵巢顆粒細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TNFRSF1B Others Cynomolgus 食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3]
HBE細(xì)胞,人支氣管上皮細(xì)胞 小鼠飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞,HPT-8細(xì)胞 CL-0170NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HUF-c 人類(lèi)子宮成纖維細(xì)胞(HUF) 500,000cells 腎上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TTC瓊脂基礎(chǔ)250g用于彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
布魯氏菌培養(yǎng)基 250g 用于布魯氏菌分離培養(yǎng)
PYG 液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) PYG Broth Base 250 用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng),使用時(shí)需加入氯化血紅素和維生素K1(GB標(biāo)準(zhǔn))
LPM瓊脂基礎(chǔ)(含七葉苷與檸檬酸鐵銨)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加incubationmediaLPM瓊脂基礎(chǔ)(含七葉苷與檸檬酸鐵銨)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加1414
AmiesTransportMedium
MCP瓊脂250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) Baird-Parker Agar Base 用于*的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
布氏菌選擇性培養(yǎng)基 Brucella Selective Medium 250 用于布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
YM肉湯250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培養(yǎng)incubationmediaYM肉湯250g/瓶用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培養(yǎng)
LactoseBroth
人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3培養(yǎng)雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基(BBL瓊脂培養(yǎng)基)27330250g用于雙歧桿菌的平板計(jì)數(shù)
Rogosa 瓊脂 (CM0627) Oxoid incubation media Rogosa 瓊脂 (CM0627) Oxoid
頭狀絲孢酵母 模式菌株,產(chǎn)核霉素。 支/瓶
大腸菌群快檢紙片(水質(zhì))5份/包用于水質(zhì)檢驗(yàn)
堿性膽鹽瓊脂 250g 用于分離霍亂弧菌
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