細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣；多角形
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實現(xiàn)為科學(xué)研究提供實驗細胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療。
2）公司細胞資源中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準確性。
3）從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

CD58 Others Human 人 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0180P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人間充質(zhì)干細胞-脂肪裂解物HMSC-ad L

ER-30細胞，人癌細胞 大鼠腺癌細胞系,MADB106細胞 淋巴成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

B16-F1(小鼠黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者)，培養(yǎng)在M2培養(yǎng)液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCL
RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞 Rattus

CM-H080人主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 )

小鼠結(jié)腸癌細胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0919

ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 (陽性對照)
小耳豬肺細胞;SEP-L2

人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )

CL-0163MSTO-211H(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

人肺支氣管癌細胞;NCI-H1650 大鼠嗅鞘細胞*培養(yǎng)基 100mL

raw264.7 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

CHST3 Others Mouse 小鼠 CHST3 / C6ST-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
柯氏尿素瓊脂250g用于細菌脲酶檢測

氣單胞菌培養(yǎng)基添加劑 5支 每支添加劑加入100ml氣單胞菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)

WS 瓊脂 WS Salmonella Agar 250 用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標準)

明膠培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌的明膠生化試驗incubationmedia明膠培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌的明膠生化試驗

GentamycinAgar
TMAOMedium

50020 BR 500g incubation media 50020 BR 500g

根霉屬的菌 控制應(yīng)變檢測副溶血性弧菌 支/瓶

LB肉湯(Lennox)250用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)

DTM添加劑1 1ml*5 每支添加于200mlDTM培養(yǎng)基中
Cas9穩(wěn)定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-558培養(yǎng)亞鹽瓊脂250g用于厭氧亞鹽還原桿菌的試管計數(shù)(SN標準)

TryptoseSoyaAgar

乙基紫疊氮鈉肉湯 Ethyl Violet Azide Broth 250 用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)

GN增菌液250g/瓶用于志賀氏菌增菌incubationmediaGN增菌液250g/瓶用于志賀氏菌增菌

TryptoseSoyaAgar