Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559品牌培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
3）從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí)，僅供參考。
4）使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風(fēng)險和責(zé)任，采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。

細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559品牌
形態(tài)特性   上皮樣；多角形
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559品牌細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0178OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物HPA-s L

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1 癌細(xì)胞，MDA-MB-435S細(xì)胞 MA891細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞

人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1

HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 Rattus

CM-H088人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人臍帶動脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUAEC)( 5×105 )

BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞;BNL 1ME A.7R.1 小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29

EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy

人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素(HEM)( 5×105 )

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞

人胎盤絨膜癌細(xì)胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細(xì)胞

TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
ModifiedSemi-SolidRappaportVassiliadsAgar

AeromonasMediumBase(Ryan)

XLD 培養(yǎng)基 Xylose Lysine Desoxycholate Medium 250 選擇性培養(yǎng)基，主要用于分離志賀氏菌屬，亦可用于分離沙門氏菌(FDA標(biāo)準(zhǔn))

小牛浸液瓊脂250g/瓶用于苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)incubationmedia小牛浸液瓊脂250g/瓶用于苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)

*瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)
氧化*胺培養(yǎng)基250g用于分解

50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑 incubation media 50010 瓊脂粉 BR 250 g 培養(yǎng)基凝固劑

酮叢毛單胞菌 反硝化細(xì)菌 支/瓶

LBBroth(Miller)

YPDAMedium
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559品牌鹽蛋白胨水培養(yǎng)基(鹽胨水培養(yǎng)基)27060250g用于鑒別綠膿桿菌分解鹽產(chǎn)氣試驗(yàn)(GB-2002,《中華人民共和國藥典》2005年版，化妝品衛(wèi)生...

支原體瓊脂基礎(chǔ) (CM0401) Oxoid incubation media 支原體瓊脂基礎(chǔ) (CM0401) Oxoid

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 模式菌株，產(chǎn)Demethyltetracycline 支/瓶

PhenylalanineDeaminaseMedium

培養(yǎng)基P 250g 用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-559品牌質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。